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DNA Cloning Service
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CRISPR/Cas

p9D35s-EFC9-U6At G640

CRISPR/Cas-Vektor mit 35s–nptII, für Dikotyle.

24681012'Cas9WT''pVS1 ORI'''ParBEF1'strep/spec'ColE1''Right Border Regionintron?NptIIo'U6At35SNptIIo''E9NOS-T'introngRNANLSLB'RBXhoI (587)MluI (1598)PstI, SbfI, NotI, NdeIBsmBI, PacIHpaI (2466)SpeI, BamHISapI (4284)NcoI (4553)SmaI, NsiI, EcoRIBstBI, HindIII, NheI, ApaIKpnI, PmeIG640p9D35s-EFC9-U6At12.831 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

Lässt sich öffnen in SnapGene Viewer (kostenlos), Benchling, ApE und Geneious.

Restriktionsschnittstellen

Single Cutter · SchnittstelleSchneidet beiLage
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG587zwischen 35S und NptIIo'
MluIA^CGCGT1.598zwischen NptIIo' und E9
PstICTGCA^G1.908zwischen E9 und EF1'
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG1.908zwischen E9 und EF1'
NotIGC^GGCCGC1.917zwischen E9 und EF1'
NdeICA^TATG1.967in EF1'
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)2.160in EF1'
PacITTAAT^TAA2.205in EF1'
HpaI (KspAI)GTT^AAC2.466in intron?
SpeIA^CTAGT3.068zwischen EF1' und Cas9WT
BamHIG^GATCC3.074zwischen EF1' und Cas9WT
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)4.284in Cas9WT
NcoIC^CATGG4.553in Cas9WT
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG7.288zwischen Cas9WT und NOS-T
NsiI (Mph1103I)ATGCA^T7.411in NOS-T
EcoRIG^AATTC7.548zwischen NOS-T und U6At
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA8.006in targetRNA
HindIIIA^AGCTT8.009in targetRNA
NheI (BmtI)G^CTAGC8.109zwischen gRNA und Right Border Region
ApaI (PspOMI)GGGCC^C8.140zwischen gRNA und Right Border Region
KpnI (Acc65I)GGTAC^C8.146zwischen gRNA und Right Border Region
PmeI (MssI)GTTT^AAAC8.178in Right Border Region

Schneiden zweimal: XbaI (163, 2.113), SphI (6.397, 8.303), SacI (1.115, 3.130), BglII (3.381, 8.129), ClaI (2.598, 2.669), SfiI (1.916, 8.123), MfeI (14, 1.008), EagI (1.917, 8.560), AatII (3.672, 8.569), BstEII (1.357, 11.981), BsaI (7.993, 8.025), AarI (1.078, 1.199).

Keine Schnittstelle: SalI, AscI, FseI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, BsrGI.

Aus der GenBank-Sequenz berechnet für 50 gängige Enzyme; Positionen bezeichnen den Schnitt im oberen Strang, ohne Dam/Dcm-Methylierung. Vektoren vergleichen in der Restriktionsschnittstellen-Suche.

Promotor 1
35s
Gen 1
nptII
Merkmale
Dikotyle, U6At
Weitere Marker
NptIIo', strep/spec
Größe
12.831 bp, zirkulär
Datum des Eintrags
23-APR-2025

Konstrukt

  • 35S–NptIIo · E9 · Selektionskassette, 169–1.898
  • MCS · 4 Single-Cutter-Schnittstellen · Pos. 1.908, 1.967
  • SfiI ×2 · flankiert die MCS · Pos. 1.916, 8.123
  • BsaI Golden Gate · Überhänge TGAT, GTTT · Pos. 7.993, 8.025
  • T-DNA-Grenzen (Borders) · LB, RB

Ligation of F940p9D35s* into G639p7D35s-EFC9-U6At*

Ausgelesen aus der GenBank-Datei; alle Vektoren im Vergleich in der Tabelle Mehrere Expressionskassetten.

Annotierte Elemente

ElementTypStartEndeLängeStrang
LB'T-DNA-Grenze (Border) misc_feature12424+
35SPromotor misc_feature169584416+
NptIIo'Selektionsmarker CDS605901297+
mut to TSchnittstelle misc_feature6886881+
'intronKodierende Sequenz CDS9021.090189+
NptIIo'Selektionsmarker CDS1.0911.594504+
mut to TSchnittstelle misc_feature1.2551.2551+
'E9Terminator misc_feature1.6081.898291+
EF1'Sonstiges misc_feature1.9243.0681.145+
ohne NamenSonstiges source1.9243.0681.145+
spliceSchnittstelle misc_feature2.2752.2784+
ohne NamenSonstiges exon2.4033.068666+
aggtSchnittstelle misc_feature2.4562.4594+
intron?Kodierende Sequenz CDS2.4583.059602+
splice?Schnittstelle misc_feature3.0583.0614+
'Cas9WTKodierende Sequenz CDS3.0897.2854.197+
NLSSchnittstelle misc_feature3.0953.11521+
NLSSchnittstelle misc_feature7.2357.28248+
NOS-TTerminator misc_feature7.2917.544254+
U6AtKodierende Sequenz CDS7.5547.998445+
'targetRNASchnittstelle CDS7.9998.02527+
hairpinSchnittstelle CDS8.0268.05530+
gRNASchnittstelle misc_feature8.0268.10883+
Right Border RegionSonstiges misc_feature8.1498.751603+
RBT-DNA-Grenze (Border) misc_feature8.1948.21724+
'ColE1''Origin / Backbone misc_feature8.7659.423659+
''pVS1 ORI'''Origin / Backbone misc_feature9.45211.4151.964+
ParBKodierende Sequenz CDS9.77810.9531.176+
strep/specSelektionsmarker CDS11.60412.6141.011+
Left Border RegionT-DNA-Grenze (Border) misc_feature12.6821630+

PromotorKodierende SequenzTerminatorSelektionsmarkerOrigin / BackboneT-DNA-Grenze (Border)Schnittstelle

Die Elementtypen werden aus den Bezeichnungen in der GenBank-Datei abgeleitet; maßgeblich ist die Datei selbst.

Zitierweise

Bitte zitieren Sie den Vektor im Methodenteil wie folgt.

p9D35s-EFC9-U6At (G640; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/crispr/p9D35s-EFC9-U6At)

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