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DNA Cloning Service
DE

pUC und E.-coli-Expression

pUbiAt-mGFPD-ocs B592

pUC-Klonierungsvektor mit Ubq10–GFP, für Dikotyle.

12345UBQ10AmpColE1gfpgfpintTocsintUbi cds 5NcoI, NotI, EagI, SpeIBamHI, SmaIEcoRI (706)BbsI (1326)HindIII, MluIBstBI (1887)MfeI (2032)ClaI (2118)BsmBI (2476)StuI, AflII, ApaIBsaI (4193)B592pUbiAt-mGFPD5.544 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

Lässt sich öffnen in SnapGene Viewer (kostenlos), Benchling, ApE und Geneious.

Restriktionsschnittstellen

Single Cutter · SchnittstelleSchneidet beiLage
NcoIC^CATGG15zwischen ColE1 und UBQ10
NotIGC^GGCCGC21zwischen ColE1 und UBQ10
EagI (Eco52I)C^GGCCG21zwischen ColE1 und UBQ10
SpeIA^CTAGT28zwischen ColE1 und UBQ10
BamHIG^GATCC34zwischen ColE1 und UBQ10
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG42zwischen ColE1 und UBQ10
EcoRIG^AATTC706in UBQ10
BbsI (BpiI)GAAGAC(2/6)1.326in int
HindIIIA^AGCTT1.524zwischen UBQ10 und gfp
MluIA^CGCGT1.530zwischen UBQ10 und gfp
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA1.887in gfp
MfeI (MunI)C^AATTG2.032in int
ClaI (BspDI)AT^CGAT2.118in gfp
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)2.476in Tocs
StuI (Eco147I)AGG^CCT2.664zwischen Tocs und Amp
AflII (BspTI)C^TTAAG2.666zwischen Tocs und Amp
ApaI (PspOMI)GGGCC^C2.687zwischen Tocs und Amp
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)4.193in Amp

Schneiden zweimal: SalI (884, 2.456), KpnI (1.768, 2.693), SacI (5, 1.139), BglII (1.451, 2.676), EcoRV (1.349, 1.382), SfiI (20, 2.670), PvuII (2.814, 5.327), XmnI (307, 3.659), SapI (1.144, 5.264).

Keine Schnittstelle: PstI, SphI, XhoI, NdeI, NheI, AscI, PacI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, NsiI, BsrGI, SacII, AatII, BstEII, AarI.

Aus der GenBank-Sequenz berechnet für 50 gängige Enzyme; Positionen bezeichnen den Schnitt im oberen Strang, ohne Dam/Dcm-Methylierung. Vektoren vergleichen in der Restriktionsschnittstellen-Suche.

Promotor 2
Ubq10
Gen 2
GFP
Merkmale
Dikotyle
Weitere Marker
Amp
Größe
5.544 bp, zirkulär
Datum des Eintrags
22-JAN-2016

Konstrukt

  • UBQ10–gfp · Tocs · Kassette mit Insert, 46–2.656
  • MCS · 6 Single-Cutter-Schnittstellen · Pos. 15, 42
  • SfiI ×2 · flankiert die Kassette UBQ10–gfp · Pos. 20, 2.670

Ligation of B494pUbiAt-DoGusi-ocs* into B444pmGFPD-ocs*

Ausgelesen aus der GenBank-Datei; alle Vektoren im Vergleich in der Tabelle Mehrere Expressionskassetten.

Annotierte Elemente

ElementTypStartEndeLängeStrang
UBQ10Sonstiges misc_feature461.5211.476+
Ubi cds 5Promotor misc_feature1.1501.21364+
intSchnittstelle misc_feature1.2161.519304+
gfpKodierende Sequenz CDS1.5471.925379+
intSchnittstelle CDS1.9262.114189+
gfpKodierende Sequenz CDS2.1152.452338+
TocsTerminator misc_feature2.4612.656196+
AmpSelektionsmarker misc_feature3.4724.332861+
ColE1Origin / Backbone CDS4.3755.091717+

PromotorKodierende SequenzTerminatorSelektionsmarkerOrigin / BackboneT-DNA-Grenze (Border)Schnittstelle

Die Elementtypen werden aus den Bezeichnungen in der GenBank-Datei abgeleitet; maßgeblich ist die Datei selbst.

Zitierweise

Bitte zitieren Sie den Vektor im Methodenteil wie folgt.

pUbiAt-mGFPD-ocs (B592; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/pUbiAt-mGFPD-ocs; RRID:SCR_029231)

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