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DNA Cloning Service
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RNAi

p7iUA-RNAi

RNAi-Vektor mit 35S–bar-intron und Act–gus-spacer, für Monokotyle.

24681012pVS1 ORIUbi-intPActSm/SpColE1GusIntron UbiZm35SbarbarT35SintT35sT35SRBLBXmnI (292)SacII, PvuIISbfI, SwaIEcoRI (1839)BsrGI, HindIIIAflII, SmaI, SpeIPacI, PmeIAatII (5521)BsiWI (9735)p7iUA-RNAi12.671 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

Lässt sich öffnen in SnapGene Viewer (kostenlos), Benchling, ApE und Geneious.

Restriktionsschnittstellen

Single Cutter · SchnittstelleSchneidet beiLage
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC292in 35S
SacII (Cfr42I)CCGC^GG1.062in bar
PvuIICAG^CTG1.122in bar
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG1.409zwischen T35S und PAct
SwaI (SmiI)ATTT^AAAT1.450zwischen T35S und PAct
EcoRIG^AATTC1.839in PAct
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA2.931zwischen T35s und Gus
HindIIIA^AGCTT2.938zwischen T35s und Gus
AflII (BspTI)C^TTAAG3.494zwischen Gus und T35S
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG3.503zwischen Gus und T35S
SpeIA^CTAGT3.570zwischen T35S und Ubi-int
PacITTAAT^TAA5.064zwischen Ubi-int und RB
PmeI (MssI)GTTT^AAAC5.130zwischen Ubi-int und RB
AatII (ZraI)GACGT^C5.521zwischen RB und ColE1
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG9.735in pVS1 ORI

Schneiden zweimal: BamHI (2.556, 3.508), XbaI (1, 4.051), SalI (891, 2.863), PstI (1.409, 3.581), SacI (2.360, 2.874), NheI (3.959, 9.851), ClaI (3.848, 9.931), EcoRV (332, 5.642), MluI (1.184, 2.924), SfiI (1.440, 5.075), AgeI (10.345, 10.653), NsiI (1.709, 3.809), BstEII (2.393, 11.216), SapI (6.574, 10.471), AarI (962, 2.150).

Keine Schnittstelle: AscI, AvrII, BstBI, HpaI, StuI.

Aus der GenBank-Sequenz berechnet für 50 gängige Enzyme; Positionen bezeichnen den Schnitt im oberen Strang, ohne Dam/Dcm-Methylierung. Vektoren vergleichen in der Restriktionsschnittstellen-Suche.

Promotor 1
35S
Gen 1
bar-intron
Promotor 2
Act
Gen 2
gus-spacer
Merkmale
Doppelpromotor-Konstrukt für Monokotyle
Weitere Marker
Sm/Sp
Größe
12.671 bp, zirkulär
Datum des Eintrags
20-JUN-2013

Konstrukt

  • 35S–bar · T35S · Selektionskassette, 7–1.402
  • PAct–(leer)–T35S · leere Expressionskassette, 1.461–3.562
  • Ubi-int–Gus · T35s · Kassette mit Insert, 2.876–5.050 (Minusstrang)
  • SfiI ×2 · flankiert 2 Kassetten · Pos. 1.440, 5.075
  • T-DNA-Grenzen (Borders) · LB, RB

Ligation of inverted 589pD1-Ubi-Act-RNAi* into p7i*

Ausgelesen aus der GenBank-Datei; alle Vektoren im Vergleich in der Tabelle Mehrere Expressionskassetten.

Annotierte Elemente

ElementTypStartEndeLängeStrang
35SPromotor misc_feature7422416+
barSelektionsmarker misc_feature439672234+
intSchnittstelle misc_feature673861189+
barSelektionsmarker misc_feature8621.179318+
T35STerminator misc_feature1.2011.402202+
PActPromotor misc_feature1.4612.8581.398+
T35sTerminator misc_feature2.8762.92449−
ohne NamenKodierende Sequenz CDS2.9443.493550+
GusKodierende Sequenz CDS2.9443.493550−
T35STerminator misc_feature3.5143.56249+
Ubi-intPromotor misc_feature3.5755.0501.476−
Intron UbiZmPromotor misc_feature3.5774.096520−
RBT-DNA-Grenze (Border) misc_feature5.1465.16924+
ColE1Origin / Backbone misc_feature5.7046.401698+
pVS1 ORIOrigin / Backbone misc_feature6.95010.6553.706+
Sm/SpSelektionsmarker CDS10.83911.8491.011+
LBT-DNA-Grenze (Border) misc_feature12.37012.39324+

PromotorKodierende SequenzTerminatorSelektionsmarkerOrigin / BackboneT-DNA-Grenze (Border)Schnittstelle

Die Elementtypen werden aus den Bezeichnungen in der GenBank-Datei abgeleitet; maßgeblich ist die Datei selbst.

Zitierweise

Bitte zitieren Sie den Vektor im Methodenteil wie folgt.

p7iUA-RNAi (DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/rnai/p7iUA-RNAi)

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