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DNA Cloning Service
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RNAi

p9i-UbiH-2xStp-RNAi

RNAi-Vektor mit 35S–npt-intron und GUBB1HA–gus-spacer.

12345678910pVS1 ORISm/SpNptIIColE1Gus35SUbiHUbiHT-35SintT35ST35SXmnI, XhoIPvuII (871)SbfI, SwaISacI, MluI, BsrGI, HindIIISmaI, BamHI, SpeIPacI, BglII, ApaI, PmeIAatII (3591)BsiWI, NheI, ClaIBstEII (9286)p9i-UbiH-2xStp-R10.741 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA

Lässt sich öffnen in SnapGene Viewer (kostenlos), Benchling, ApE und Geneious.

Restriktionsschnittstellen

Single Cutter · SchnittstelleSchneidet beiLage
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC292in 35S
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG425zwischen 35S und NptII
PvuIICAG^CTG871in NptII
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG1.652zwischen T-35S und UbiH
SwaI (SmiI)ATTT^AAAT1.693zwischen T-35S und UbiH
SacI (Ecl136II)GAGCT^C2.060zwischen UbiH und T35S
MluIA^CGCGT2.114zwischen T35S und Gus
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA2.121zwischen T35S und Gus
HindIIIA^AGCTT2.128zwischen T35S und Gus
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG2.693zwischen Gus und T35S
BamHIG^GATCC2.698zwischen Gus und T35S
SpeIA^CTAGT2.764zwischen T35S und UbiH
PacITTAAT^TAA3.134zwischen UbiH und BR
BglIIA^GATCT3.151zwischen UbiH und BR
ApaI (PspOMI)GGGCC^C3.162zwischen UbiH und BR
PmeI (MssI)GTTT^AAAC3.200zwischen UbiH und BR
AatII (ZraI)GACGT^C3.591zwischen BR und ColE1
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG7.805in pVS1 ORI
NheI (BmtI)G^CTAGC7.921in pVS1 ORI
ClaI (BspDI)AT^CGAT8.001in pVS1 ORI
BstEII (Eco91I)G^GTNACC9.286in Sm/Sp

Schneiden zweimal: PstI (818, 1.652), KpnI (1.702, 3.168), NdeI (4.706, 6.465), EcoRV (332, 3.712), SfiI (1.683, 3.145), FseI (5.472, 7.577), AgeI (8.415, 8.723), BsmBI (4.884, 5.937).

Keine Schnittstelle: EcoRI, AscI, AvrII, BstBI, HpaI, StuI, NsiI, SacII, AarI.

Aus der GenBank-Sequenz berechnet für 50 gängige Enzyme; Positionen bezeichnen den Schnitt im oberen Strang, ohne Dam/Dcm-Methylierung. Vektoren vergleichen in der Restriktionsschnittstellen-Suche.

Promotor 1
35S
Gen 1
npt-intron
Promotor 2
GUBB1HA
Gen 2
gus-spacer
Merkmale
Doppelpromotor-Konstrukt GUBB1HA mit verbesserten Terminationssignalen
Weitere Marker
Sm/Sp
Größe
10.741 bp, zirkulär
Datum des Eintrags
20-JUN-2013

Konstrukt

  • 35S–NptII · Selektionskassette, 7–1.431
  • UbiH–(leer)–T35S · leere Expressionskassette, 1.704–2.756
  • UbiH–Gus · T35S · Kassette mit Insert, 2.062–3.114 (Minusstrang)
  • MCS · 4 Single-Cutter-Schnittstellen · Pos. 3.134, 3.200
  • SfiI ×2 · flankiert 2 Kassetten · Pos. 1.683, 3.145

Ligation of inverted A252pD1-UbiH-2xStp-RNAi* into p9i*

Ausgelesen aus der GenBank-Datei; alle Vektoren im Vergleich in der Tabelle Mehrere Expressionskassetten.

Annotierte Elemente

ElementTypStartEndeLängeStrang
35SPromotor misc_feature7422416+
NptIISchnittstelle CDS43947537+
intSchnittstelle misc_feature476664189+
NptIISelektionsmarker CDS6651.431767+
T-35SPromotor misc_feature1.4441.645202+
UbiHPromotor misc_feature1.7042.047344+
T35STerminator misc_feature2.0622.11453−
ohne NamenKodierende Sequenz CDS2.1342.683550+
GusKodierende Sequenz CDS2.1342.683550−
T35STerminator misc_feature2.7042.75653+
UbiHPromotor misc_feature2.7713.114344−
BRSchnittstelle misc_feature3.2163.23924+
ColE1Origin / Backbone misc_feature3.7744.471698+
pVS1 ORIOrigin / Backbone misc_feature5.0208.7253.706+
Sm/SpSelektionsmarker CDS8.9099.9191.011+
BLSchnittstelle misc_feature10.44010.46324+

PromotorKodierende SequenzTerminatorSelektionsmarkerOrigin / BackboneT-DNA-Grenze (Border)Schnittstelle

Die Elementtypen werden aus den Bezeichnungen in der GenBank-Datei abgeleitet; maßgeblich ist die Datei selbst.

Zitierweise

Bitte zitieren Sie den Vektor im Methodenteil wie folgt.

p9i-UbiH-2xStp-RNAi (DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/rnai/p9i-UbiH-2xStp-RNAi)

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