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DNA Cloning Service
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Binaires

p7D35s-UbiAt-mEGFP E039

Vecteur binaire avec 35s–bar et Ubq10–mEGFP, pour les dicotylédones.

123456789''pVS1 ORI'''Pro-Ubq10AtParBstrep/specColE1Right Border RegionP35SmEGFPmEGFPBaríntronTE9BarOCSSTLS1ST-LS1Ubi cds 5LB'RBXhoI (587)AarI (1128)PstI, SbfI, NotI, SpeIBamHI, SmaIEcoRI (2350)SacI, SapIHindIII (3168)BstBI (3531)ClaI (3762)BsmBI (4121)PmeI, SphIAatII (4766)BstEII (8178)E039p7D35s-UbiAt9 028 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG587entre P35S et Bar
AarICACCTGC(4/8)1 128dans Bar
PstICTGCA^G1 656entre TE9 et Pro-Ubq10At
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG1 656entre TE9 et Pro-Ubq10At
NotIGC^GGCCGC1 665entre TE9 et Pro-Ubq10At
SpeIA^CTAGT1 672entre TE9 et Pro-Ubq10At
BamHIG^GATCC1 678entre TE9 et Pro-Ubq10At
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG1 686entre TE9 et Pro-Ubq10At
EcoRIG^AATTC2 350dans Pro-Ubq10At
SacI (Ecl136II)GAGCT^C2 783dans Pro-Ubq10At
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)2 788dans Pro-Ubq10At
HindIIIA^AGCTT3 168entre Pro-Ubq10At et mEGFP
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA3 531dans mEGFP
ClaI (BspDI)AT^CGAT3 762dans mEGFP
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)4 121dans OCS
PmeI (MssI)GTTT^AAAC4 375dans Right Border Region
SphI (PaeI)GCATG^C4 500dans Right Border Region
AatII (ZraI)GACGT^C4 766dans Right Border Region
BstEII (Eco91I)G^GTNACC8 178dans strep/spec

Double coupure : SalI (2 528, 4 101), KpnI (3 412, 4 343), BglII (3 095, 4 321), MluI (1 346, 3 174), SfiI (1 664, 4 315), StuI (1 658, 4 309), EagI (1 665, 4 757), SacII (1 228, 1 245).

Aucun site : NcoI, NdeI, NheI, AscI, PacI, FseI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, NsiI, AflII, BsrGI, PvuII, BsaI.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 1
35s
Gène 1
bar
Promoteur 2
Ubq10
Gène 2
mEGFP
Caractéristiques
dicotylédones
Autres marqueurs
strep/spec
Taille
9 028 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
26-AUG-2020

Construction

  • P35S–Bar · TE9 · cassette de sélection, 169–1 646
  • Pro-Ubq10At–mEGFP · OCS · cassette avec insert, 1 690–4 301
  • MCS · 6 sites uniques · en 1 656, 1 686
  • SfiI ×2 · encadre la cassette Pro-Ubq10At–mEGFP · en 1 664, 4 315
  • Bordures de l’ADN-T · LB, RB

Ligation of E038pUbiAt-mEGFP* into D011p7D35s*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
LB'Bordure de l’ADN-T misc_feature12424+
P35SPromoteur misc_feature169584416+
BarMarqueur de sélection CDS605838234+
STLS1Autre misc_feature8391 027189+
BarMarqueur de sélection CDS1 0281 343316+
TE9Terminateur misc_feature1 3561 646291+
Pro-Ubq10AtPromoteur misc_feature1 6903 1651 476+
TATASite misc_feature2 7612 7644+
Ubi cds 5Promoteur misc_feature2 7942 85966+
íntronAutre misc_feature2 8603 163304+
mEGFPSéquence codante CDS3 1913 569379+
ST-LS1Séquence codante CDS3 5703 758189+
mEGFPSéquence codante CDS3 7594 096338+
A206K - monomeric proteinSite misc_feature3 9953 9973+
OCSTerminateur misc_feature4 1064 301196+
Right Border RegionAutre misc_feature4 3464 948603+
RBBordure de l’ADN-T misc_feature4 3914 41424+
ColE1Origine / squelette misc_feature4 9625 620659+
''pVS1 ORI'''Origine / squelette misc_feature5 6497 6121 964+
ParBSéquence codante CDS5 9757 1501 176+
strep/specMarqueur de sélection CDS7 8018 8111 011+
Left Border RegionBordure de l’ADN-T misc_feature8 8791630+

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

p7D35s-UbiAt-mEGFP (E039; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/binaries/p7D35s-UbiAt-mEGFP)

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