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DNA Cloning Service
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Binaires

p7o2x35s-ActOs-LGFP C683

Vecteur binaire avec 35s–bar et Act–EGFP, pour les monocotylédones.

24681012pVS1PActSm/SpP35SColE1mRNAintronEGFPEGFPBarTE9BarOCSSTLS1ST-LS1linkLBRBXbaI (303)XhoI (1098)SbfI, NcoINsiI (2466)SacI (3117)SpeI, SmaI, HindIII, MluIBsrGI (3658)BstBI (4055)SalI (4625)StuI, AflII, KpnI, PmeIAatII (5285)BsiWI, NheIC683p7o2x35s-Act12 133 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
XbaIT^CTAGA303entre LB et P35S
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG1 098entre P35S et Bar
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG2 176entre TE9 et PAct
NcoIC^CATGG2 202entre TE9 et PAct
NsiI (Mph1103I)ATGCA^T2 466dans PAct
SacI (Ecl136II)GAGCT^C3 117dans mRNA
SpeIA^CTAGT3 615entre PAct et link
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG3 630entre PAct et link
HindIIIA^AGCTT3 646entre PAct et link
MluIA^CGCGT3 652entre PAct et link
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA3 658entre PAct et link
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA4 055dans EGFP
SalIG^TCGAC4 625entre EGFP et OCS
StuI (Eco147I)AGG^CCT4 833entre OCS et RB
AflII (BspTI)C^TTAAG4 835entre OCS et RB
KpnI (Acc65I)GGTAC^C4 862entre OCS et RB
PmeI (MssI)GTTT^AAAC4 894entre OCS et RB
AatII (ZraI)GACGT^C5 285entre RB et ColE1
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG9 499dans pVS1
NheI (BmtI)G^CTAGC9 615dans pVS1

Double coupure : EcoRI (2 596, 3 640), BamHI (3 313, 3 622), PstI (2 176, 3 638), SphI (2 182, 5 019), ClaI (4 286, 9 695), EcoRV (966, 5 406), SfiI (2 207, 4 839), AgeI (10 109, 10 417), SacII (1 739, 1 756), XmnI (601, 926), BstEII (3 150, 10 980), SapI (6 338, 10 235), AarI (1 639, 2 907).

Aucun site : AscI, PacI, SwaI, AvrII, HpaI, PvuII.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 1
35s
Gène 1
bar
Promoteur 2
Act
Gène 2
EGFP
Caractéristiques
monocotylédones
Autres marqueurs
Sm/Sp
Taille
12 133 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
26-AUG-2020

Construction

  • P35S–Bar · TE9 · cassette de sélection, 314–2 166
  • PAct–EGFP · OCS · cassette avec insert, 2 218–4 825
  • MCS · 5 sites uniques · en 3 615, 3 658
  • SfiI ×2 · encadre la cassette PAct–EGFP · en 2 207, 4 839
  • Bordures de l’ADN-T · LB, RB

Ligation of B635pActOs-LGFP* into B484p7o2x35s-LH*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
LBBordure de l’ADN-T misc_feature12424+
P35SPromoteur misc_feature3141 098785+
BarMarqueur de sélection CDS1 1161 349234+
STLS1Autre misc_feature1 3501 538189+
BarMarqueur de sélection CDS1 5391 856318+
TE9Terminateur misc_feature1 8762 166291+
PActPromoteur misc_feature2 2183 6151 398+
mRNAAutre misc_feature3 0613 615555+
intronSite misc_feature3 1513 612462+
linkSite misc_feature3 6643 71451+
EGFPSéquence codante CDS3 7154 093379+
mut okSite misc_feature3 9333 9331+
ST-LS1Séquence codante CDS4 0944 282189+
EGFPSéquence codante CDS4 2834 620338+
OCSTerminateur misc_feature4 6304 825196+
RBBordure de l’ADN-T misc_feature4 9104 93324+
ColE1Origine / squelette misc_feature5 4686 165698+
pVS1Origine / squelette misc_feature6 71410 4193 706+
Sm/SpMarqueur de sélection CDS10 60311 6131 011+

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

p7o2x35s-ActOs-LGFP (C683; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/binaries/p7o2x35s-ActOs-LGFP)

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