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DNA Cloning Service
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Binaires · Cassettes multiples

p7oR3-ActO-ActO-UbiZ-UbiZ F510

Vecteur binaire avec Act–bar.

2468101214'pVS1'Ubi-int'Ubi-intpActpActSm/SpP2x35s'ColE1mRNAmRNAIntronIntronintronintronBar'E9NOS-T'Bar'Thsp17T35SOCSSTLS1SbfI (2174)SpeI, SmaI, AflIIHindIII, SalI, BsrGI, SwaIAscI (7063)AvrII, MluIPacI, KpnI, PmeI, SphIAatII (9516)F510p7oR3-ActO-ActO…15 185 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG2 174entre E9 et pAct
SpeIA^CTAGT3 574entre pAct et NOS-T'
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG3 589entre pAct et NOS-T'
AflII (BspTI)C^TTAAG3 633dans NOS-T'
HindIIIA^AGCTT5 285entre pAct et OCS
SalIG^TCGAC5 297entre pAct et OCS
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA5 500entre OCS et Ubi-int
SwaI (SmiI)ATTT^AAAT5 523entre OCS et Ubi-int
AscI (SgsI)GG^CGCGCC7 063entre Ubi-int et Thsp17
AvrII (XmaJI)C^CTAGG8 818entre Ubi-int et T35S
MluIA^CGCGT8 830entre Ubi-int et T35S
PacITTAAT^TAA9 059entre T35S et RB
KpnI (Acc65I)GGTAC^C9 093entre T35S et RB
PmeI (MssI)GTTT^AAAC9 125entre T35S et RB
SphI (PaeI)GCATG^C9 250entre RB et ColE1
AatII (ZraI)GACGT^C9 516entre RB et ColE1

Double coupure : EcoRI (2 555, 4 252), SacI (3 076, 4 773), EcoRV (966, 9 637), SfiI (5 513, 9 070), AgeI (13 161, 13 469), SacII (1 739, 1 756), XmnI (601, 926), SapI (10 569, 13 287).

Aucun site : BstBI, HpaI, StuI, PvuII.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 1
Act
Gène 1
bar
Promoteur 2
UbiZm
Autres marqueurs
Sm/Sp
Taille
15 185 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
08-JUN-2023

Construction

  • P2x35s–Bar · E9 · cassette de sélection, 314–2 164
  • pAct–(vide)–NOS-T · cassette d’expression vide, 2 177–3 852
  • pAct–(vide)–OCS · cassette d’expression vide, 3 874–5 497
  • Ubi-int–(vide)–Thsp17 · cassette d’expression vide, 5 536–7 277
  • Ubi-int–(vide)–T35S · cassette d’expression vide, 7 307–9 041
  • SfiI ×2 · encadre 2 cassettes · en 5 513, 9 070
  • AscI/PacI · un site chacun · en 7 063, 9 059
  • Bordures de l’ADN-T · LB, RB

Ligation of F516pBA-2xActOs* into F508p7o2x35soR3-UbiZ-UbiZ*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
LBBordure de l’ADN-T misc_feature12424+
P2x35s'Promoteur misc_feature3141 098785+
BarMarqueur de sélection CDS1 1161 349234+
STLS1Autre misc_feature1 3501 538189+
BarMarqueur de sélection CDS1 5391 856318+
'E9Terminateur misc_feature1 8742 164291+
pActPromoteur misc_feature2 1773 5741 398+
AT reichSite CDS2 8342 87239+
mRNASéquence codante CDS3 0203 574555+
intronSite CDS3 1103 571462+
NOS-T'Terminateur misc_feature3 6043 852249+
pActPromoteur misc_feature3 8745 2711 398+
AT reichSite CDS4 5314 56939+
mRNASéquence codante CDS4 7175 271555+
intronSite CDS4 8075 268462+
OCSTerminateur misc_feature5 3025 497196+
'Ubi-intPromoteur misc_feature5 5367 0431 508+
IntronSite misc_feature6 5227 041520+
'Thsp17Autre misc_feature7 0717 277207+
'Ubi-intPromoteur misc_feature7 3078 8141 508+
IntronSite misc_feature8 2938 812520+
T35STerminateur misc_feature8 8409 041202+
RBBordure de l’ADN-T misc_feature9 1419 16424+
ColE1Origine / squelette misc_feature9 69910 396698+
'pVS1Origine / squelette misc_feature10 68413 4712 788+
Sm/SpMarqueur de sélection CDS13 65514 6651 011+

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

p7oR3-ActO-ActO-UbiZ-UbiZ (F510; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/binaries/p7oR3-ActO-ActO-UbiZ-UbiZ)

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