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DNA Cloning Service
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pUC et expression chez E. coli

pUbiAt-LGFP B631

Vecteur de clonage pUC avec Ubq10–Link-GFP, pour les dicotylédones.

12345UBQ10AmpColE1gfpmgfpmintTocsintUbi cds 5linkNcoI, NotI, EagIBbsI (1406)SpeI, BamHI, SmaI, PstIHindIII, MluI, BsrGIBstBI (2041)MfeI (2186)ClaI (2272)BsmBI (2631)StuI, AflII, ApaI, KpnIBsaI (4348)B631pUbiAt-LGFP5 601 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
NcoIC^CATGG113entre ColE1 et UBQ10
NotIGC^GGCCGC119entre ColE1 et UBQ10
EagI (Eco52I)C^GGCCG119entre ColE1 et UBQ10
BbsI (BpiI)GAAGAC(2/6)1 406dans int
SpeIA^CTAGT1 602entre UBQ10 et link
BamHIG^GATCC1 608entre UBQ10 et link
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG1 616entre UBQ10 et link
PstICTGCA^G1 624entre UBQ10 et link
HindIIIA^AGCTT1 632entre UBQ10 et link
MluIA^CGCGT1 638entre UBQ10 et link
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA1 644entre UBQ10 et link
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA2 041dans gfpm
MfeI (MunI)C^AATTG2 186dans int
ClaI (BspDI)AT^CGAT2 272dans gfpm
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)2 631dans Tocs
StuI (Eco147I)AGG^CCT2 819entre Tocs et Amp
AflII (BspTI)C^TTAAG2 821entre Tocs et Amp
ApaI (PspOMI)GGGCC^C2 842entre Tocs et Amp
KpnI (Acc65I)GGTAC^C2 848entre Tocs et Amp
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)4 348dans Amp

Double coupure : EcoRI (786, 1 626), SalI (964, 2 611), SacI (103, 1 219), BglII (1 531, 2 831), EcoRV (1 429, 1 462), SfiI (118, 2 825), PvuII (2 969, 5 482), XmnI (387, 3 814), SapI (1 224, 5 419).

Aucun site : SphI, XhoI, NdeI, NheI, AscI, PacI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, NsiI, SacII, AatII, BstEII, AarI.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 2
Ubq10
Gène 2
Link-GFP
Caractéristiques
dicotylédones
Autres marqueurs
Amp
Taille
5 601 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
08-FEB-2016

Construction

  • UBQ10–gfpm · Tocs · cassette avec insert, 126–2 811
  • MCS · 7 sites uniques · en 1 602, 1 644
  • SfiI ×2 · encadre la cassette UBQ10–gfpm · en 118, 2 825

Ligation of B629p35s-LGFP* into 204pUbiAtmu-ocs*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
UBQ10Autre misc_feature1261 6011 476+
Ubi cds 5Promoteur misc_feature1 2301 29364+
intSite misc_feature1 2961 599304+
linkAutre misc_feature1 6501 70051+
gfpmSéquence codante CDS1 7012 079379+
intSite CDS2 0802 268189+
gfpmSéquence codante CDS2 2692 606338+
TocsTerminateur misc_feature2 6162 811196+
AmpMarqueur de sélection misc_feature3 6274 487861+
ColE1Origine / squelette misc_feature4 5305 246717+

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

pUbiAt-LGFP (B631; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/pUbiAt-LGFP)

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