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DNA Cloning Service
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pUC et expression chez E. coli

pet28-MBP-Mad7 F466

Vecteur d’expression pour E. coli avec MAD7.

12345678910'Mad7'ORF-1MBP'lacIaph(3')-IaropbomXbaI, NdeI, BsaIBsiWI (455)BamHI, SalI, KpnIHindIII (2722)NheI (2951)PstI, XhoISmaI (6440)SapI (7629)ApaI (9410)SphI (10146)F466pet28-MBP-Mad710 334 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
XbaIT^CTAGA67entre lacI et His tag
NdeICA^TATG160dans ORF-1
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)228dans MBP'
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG455dans MBP'
BamHIG^GATCC1 329dans MBP'
SalIG^TCGAC1 348entre ORF-1 et Mad7'
KpnI (Acc65I)GGTAC^C1 387dans Mad7'
HindIIIA^AGCTT2 722dans Mad7'
NheI (BmtI)G^CTAGC2 951dans Mad7'
PstICTGCA^G5 172entre Mad7' et NLS
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG5 209entre NLS et 6xHis affinity tag
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG6 440dans aph(3')-Ia
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)7 629entre aph(3')-Ia et bom
ApaI (PspOMI)GGGCC^C9 410dans lacI
SphI (PaeI)GCATG^C10 146entre lacI et His tag

Double coupure : SacI (1 275, 1 345), NcoI (106, 1 126), MluI (2 761, 9 613), NsiI (6 202, 6 468).

Aucun site : NotI, SpeI, AscI, PacI, SfiI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, MfeI, AgeI, StuI, AflII, EagI, SacII, AatII, AarI.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Gène 2
MAD7
Taille
10 334 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
04-MAY-2023

Ligation of No-NLS-MBP_PCR2* into F460-pet28-MBP-NLS-Mad7-NLS*

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
His tagSite CDS10813730+
ORF-1Séquence codante CDS1081 3481 241+
thrombin recognition and cleavage siteSite CDS14115818+
MBP'Séquence codante CDS1651 3481 184+
'Mad7'Séquence codante CDS1 3805 1623 783+
'NLSSite misc_feature5 1735 20836+
6xHis affinity tagSite CDS5 2155 23218+
aph(3')-IaSéquence codante CDS5 9316 746816−
bomOrigine / squelette misc_feature7 6427 784143−
ropSéquence codante CDS7 8868 077192−
lacISéquence codante CDS8 8869 9681 083−

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

pet28-MBP-Mad7 (F466; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/pet28-MBP-Mad7)

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