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DNA Cloning Service
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ARNi

p9-Ubi-RNAi2

Vecteur ARNi avec 35S–npt et Ubi-maize–gus-spacer, pour les monocotylédones.

24681012pVS1'Ubi-int''Ubi-int'Sm/SpNptIIColE1GusGusIntronIntronP35ST35ST35sT35SRBLBXmnI (292)PvuII (682)SbfI, SwaIAarI, SalI, SacI, MluIBsrGI, HindIIIAflII, SmaI, BamHI, SpeIPacI, PmeIAatII (5653)BsiWI (9867)BstEII (11348)p9-Ubi-RNAi212 803 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC292dans P35S
PvuIICAG^CTG682dans NptII
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG1 463entre T35S et Ubi-int'
SwaI (SmiI)ATTT^AAAT1 504entre T35S et Ubi-int'
AarICACCTGC(4/8)2 977dans Intron
SalIG^TCGAC2 992entre Ubi-int' et T35s
SacI (Ecl136II)GAGCT^C3 003entre Ubi-int' et T35s
MluIA^CGCGT3 053entre T35s et Gus
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA3 060entre T35s et Gus
HindIIIA^AGCTT3 067entre T35s et Gus
AflII (BspTI)C^TTAAG3 623entre Gus et T35S
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG3 632entre Gus et T35S
BamHIG^GATCC3 637entre Gus et T35S
SpeIA^CTAGT3 699entre T35S et Ubi-int'
PacITTAAT^TAA5 196entre Ubi-int' et RB
PmeI (MssI)GTTT^AAAC5 262entre Ubi-int' et RB
AatII (ZraI)GACGT^C5 653entre RB et ColE1
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG9 867dans pVS1
BstEII (Eco91I)G^GTNACC11 348dans Sm/Sp

Double coupure : KpnI (1 513, 5 230), EcoRV (332, 5 774), SfiI (1 494, 5 207), FseI (7 534, 9 639), AgeI (10 477, 10 785), NsiI (2 760, 3 939), BsaI (10 386, 10 806), BsmBI (6 946, 7 999).

Aucun site : EcoRI, AscI, AvrII, BstBI, HpaI, StuI, SacII.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 1
35S
Gène 1
npt
Promoteur 2
Ubi-maize
Gène 2
gus-spacer
Caractéristiques
construction à double promoteur pour monocotylédones
Autres marqueurs
NptII, Sm/Sp
Taille
12 803 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
13-FEB-2013

Construction

  • P35S–NptII · T35S · cassette de sélection, 7–1 456
  • Ubi-int–Gus · T35S · cassette avec insert, 1 516–3 691
  • Ubi-int–Gus · T35s · cassette avec insert, 3 005–5 180 (brin −)
  • MCS · 6 sites uniques · en 2 977, 3 067
  • SfiI ×2 · encadre 2 cassettes · en 1 494, 5 207
  • Bordures de l’ADN-T · LB, RB

Ligation of inverted A287pD1-Ubi-RNAi2* into pLH9000*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
P35SPromoteur misc_feature7422416+
NptIIMarqueur de sélection CDS4391 242804+
T35STerminateur misc_feature1 2551 456202+
'Ubi-int'Promoteur misc_feature1 5162 9911 476+
IntronSite misc_feature2 4702 989520+
T35sTerminateur misc_feature3 0053 05349−
GusSéquence codante CDS3 0733 622550+
GusSéquence codante CDS3 0733 622550−
T35STerminateur misc_feature3 6433 69149+
'Ubi-int'Promoteur misc_feature3 7055 1801 476−
IntronSite misc_feature3 7074 226520−
RBBordure de l’ADN-T misc_feature5 2785 30124+
ColE1Origine / squelette misc_feature5 8366 533698+
pVS1Origine / squelette misc_feature7 08210 7873 706+
corrected sequence, not gSite misc_signal7 4657 4651+
Sm/SpMarqueur de sélection misc_feature10 97111 9811 011+
LBBordure de l’ADN-T misc_feature12 50212 52524+

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

p9-Ubi-RNAi2 (DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/rnai/p9-Ubi-RNAi2)

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