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DNA Cloning Service
PT

Binários

p6o-LH-35s-LmEGFP D365

Vetor binário com 35s–hptII e 35s–link-mEGFP, para dicotiledôneas.

1234567891011pVS1Sm/SpColE1hptIIhptII35S-ProP35SmEGFPmEGFPTE9bomOCSintST-LS1LinkerLBRBXbaI (303)XhoI (727)SbfI, NcoISpeI, BamHI, SmaI, EcoRIHindIII, BsrGIBstBI (3176)SalI (3746)AflII, BglII, ApaI, KpnIPmeI (4015)AatII (4406)BsiWI, NheID365p6o-LH-35s-L11.254 bp

Sítios de restrição

Corte único · sítioCorta emLocalização
XbaIT^CTAGA303entre LB e P35S
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG727entre P35S e Kozak
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG2.270entre TE9 e 35S-Pro
NcoIC^CATGG2.296entre TE9 e 35S-Pro
SpeIA^CTAGT2.736em 35S-Pro
BamHIG^GATCC2.743entre 35S-Pro e Linker
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG2.751entre 35S-Pro e Linker
EcoRIG^AATTC2.761entre 35S-Pro e Linker
HindIIIA^AGCTT2.767entre 35S-Pro e Linker
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA2.779entre 35S-Pro e Linker
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA3.176em mEGFP
SalIG^TCGAC3.746entre mEGFP e OCS
AflII (BspTI)C^TTAAG3.956entre OCS e RB
BglIIA^GATCT3.966entre OCS e RB
ApaI (PspOMI)GGGCC^C3.977entre OCS e RB
KpnI (Acc65I)GGTAC^C3.983entre OCS e RB
PmeI (MssI)GTTT^AAAC4.015entre OCS e RB
AatII (ZraI)GACGT^C4.406entre RB e ColE1
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG8.620em pVS1
NheI (BmtI)G^CTAGC8.736em pVS1

Corte duplo: PstI (2.270, 2.759), SphI (2.276, 4.140), NdeI (5.521, 7.280), ClaI (3.407, 8.816), MluI (1.960, 2.773), SfiI (2.301, 3.960), FseI (6.287, 8.392), AgeI (9.230, 9.538), StuI (1.641, 3.954), SacII (1.115, 1.945), BstEII (1.035, 10.101), SapI (5.459, 9.356).

Sem sítio: SacI, AscI, PacI, SwaI, AvrII, HpaI, NsiI, PvuII, AarI.

Calculado a partir da sequência GenBank para 50 enzimas comuns; as posições são o corte na fita superior, sem metilação Dam/Dcm. Compare vetores no localizador de sítios de restrição.

Promotor 1
35s
Gene 1
hptII
Promotor 2
35s
Gene 2
link-mEGFP
Características
dicotiledôneas
Outros marcadores
Sm/Sp
Tamanho
11.254 bp, circular
Data do registro
26-AUG-2020

Construção

  • P35S–hptII · TE9 · cassete de seleção, 309–2.260
  • 35S-Pro–mEGFP · OCS · cassete com inserto, 2.315–3.946
  • MCS · 6 sítios únicos · em 2.736, 2.779
  • SfiI ×2 · flanqueia o cassete 35S-Pro–mEGFP · em 2.301, 3.960
  • Bordas do T-DNA · LB, RB

Ligation of D360p35s-LmEGFP* into B413p6o-LH*

Extraído do arquivo GenBank; compare todos os vetores na tabela de múltiplos cassetes de expressão.

Elementos anotados

ElementoTipoInícioFimComprimentoFita
LBBorda do T-DNA misc_feature12424+
P35SPromotor misc_feature309724416+
KozakSítio misc_feature7407445+
hptIIMarcador de seleção CDS7451.314570+
intSítio misc_feature1.3151.503189+
hptIIMarcador de seleção CDS1.5041.959456+
TE9Terminador misc_feature1.9702.260291+
35S-ProPromotor misc_feature2.3152.737423+
TATASítio CDS2.7032.7097+
LinkerSequência codificadora CDS2.7852.83551+
mEGFPSequência codificadora CDS2.8363.214379+
F64L/S65T - enhanced fluorescenceSítio misc_feature3.0253.0306+
ST-LS1Sequência codificadora CDS3.2153.403189+
mEGFPSequência codificadora CDS3.4043.741338+
A206K - monomeric proteinSítio misc_feature3.6403.6423+
OCSTerminador misc_feature3.7513.946196+
RBBorda do T-DNA misc_feature4.0314.05424+
ColE1Origem / backbone misc_feature4.5895.286698+
bomOrigem / backbone misc_feature5.3235.582260+
pVS1Origem / backbone misc_feature5.8359.5403.706+
Sm/SpMarcador de seleção CDS9.72410.7341.011+

PromotorSequência codificadoraTerminadorMarcador de seleçãoOrigem / backboneBorda do T-DNASítio

Os tipos de elemento são deduzidos das anotações do arquivo GenBank; o próprio arquivo é a referência.

Como citar

Cite o vetor assim na seção de Métodos (Material e Métodos).

p6o-LH-35s-LmEGFP (D365; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/binaries/p6o-LH-35s-LmEGFP)

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