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DNA Cloning Service
PT

pUC e expressão em E. coli

p35s-LGFP B629

Vetor de clonagem pUC com 35s–Link-GFP, para monocotiledôneas e dicotiledôneas.

1234AmpColE1P35SgfpmgfpmTocsintlinkSacI, XbaI, NcoI, NotIEagI (93)EcoRV (434)SpeI, BamHI, SmaI, PstIEcoRI, HindIII, MluI, BsrGIBstBI (967)MfeI (1112)ClaI (1198)SalI, BsmBIStuI, AflII, BglII, ApaIKpnI (1774)BsaI (3274)SapI (4345)B629p35s-LGFP4.553 bp

Sítios de restrição

Corte único · sítioCorta emLocalização
SacI (Ecl136II)GAGCT^C77entre ColE1 e P35S
XbaIT^CTAGA79entre ColE1 e P35S
NcoIC^CATGG87entre ColE1 e P35S
NotIGC^GGCCGC93entre ColE1 e P35S
EagI (Eco52I)C^GGCCG93entre ColE1 e P35S
EcoRV (Eco32I)GAT^ATC434em P35S
SpeIA^CTAGT527em P35S
BamHIG^GATCC534entre P35S e link
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG542entre P35S e link
PstICTGCA^G550entre P35S e link
EcoRIG^AATTC552entre P35S e link
HindIIIA^AGCTT558entre P35S e link
MluIA^CGCGT564entre P35S e link
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA570entre P35S e link
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA967em gfpm
MfeI (MunI)C^AATTG1.112em int
ClaI (BspDI)AT^CGAT1.198em gfpm
SalIG^TCGAC1.537entre gfpm e Tocs
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)1.557em Tocs
StuI (Eco147I)AGG^CCT1.745entre Tocs e Amp
AflII (BspTI)C^TTAAG1.747entre Tocs e Amp
BglIIA^GATCT1.757entre Tocs e Amp
ApaI (PspOMI)GGGCC^C1.768entre Tocs e Amp
KpnI (Acc65I)GGTAC^C1.774entre Tocs e Amp
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)3.274em Amp
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)4.345entre ColE1 e P35S

Corte duplo: SfiI (92, 1.751), PvuI (1.926, 2.971), PvuII (1.895, 4.408), XmnI (394, 2.740).

Sem sítio: SphI, XhoI, NdeI, NheI, AscI, PacI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, NsiI, SacII, AatII, BstEII, AarI.

Calculado a partir da sequência GenBank para 50 enzimas comuns; as posições são o corte na fita superior, sem metilação Dam/Dcm. Compare vetores no localizador de sítios de restrição.

Promotor 2
35s
Gene 2
Link-GFP
Características
monocotiledôneas e dicotiledôneas
Outros marcadores
Amp
Tamanho
4.553 bp, circular
Data do registro
08-FEB-2016

Construção

  • P35S–gfpm · Tocs · cassete com inserto, 106–1.737
  • MCS · 8 sítios únicos · em 527, 570
  • SfiI ×2 · flanqueia o cassete P35S–gfpm · em 92, 1.751

Ligation of B616p6oAct-UbiZm-oGFPi-LH* into p35-OCS-BM*

Extraído do arquivo GenBank; compare todos os vetores na tabela de múltiplos cassetes de expressão.

Elementos anotados

ElementoTipoInícioFimComprimentoFita
P35SPromotor misc_feature106528423+
linkOutro misc_feature57662651+
gfpmSequência codificadora CDS6271.005379+
intSítio CDS1.0061.194189+
gfpmSequência codificadora CDS1.1951.532338+
TocsTerminador misc_feature1.5421.737196+
AmpMarcador de seleção misc_feature2.5533.413861+
ColE1Origem / backbone misc_feature3.4564.172717+

PromotorSequência codificadoraTerminadorMarcador de seleçãoOrigem / backboneBorda do T-DNASítio

Os tipos de elemento são deduzidos das anotações do arquivo GenBank; o próprio arquivo é a referência.

Como citar

Cite o vetor assim na seção de Métodos (Material e Métodos).

p35s-LGFP (B629; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/p35s-LGFP)

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