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DNA Cloning Service
PT

pUC e expressão em E. coli

pHC-ZmUbi-Act E843

Vetor de clonagem pUC.

24681012ORF-1Ubi-int''pActColE1repAIntron'PU6C4repALIRLIRNOS-T'LacZT35SIRintLacZ'NLSKpnI (807)AgeI (1199)AscI (1736)FseI (2505)BbsI, AvrIINotI, EagIMfeI (4700)SmaI (9775)HindIII, StuIE843pHC-ZmUbi-Act12.628 bp

Sítios de restrição

Corte único · sítioCorta emLocalização
KpnI (Acc65I)GGTAC^C807em LacZ
AgeI (BshTI)A^CCGGT1.199entre LIR e SIR
AscI (SgsI)GG^CGCGCC1.736entre LIR e pAct
FseIGGCCGG^CC2.505em pAct
BbsI (BpiI)GAAGAC(2/6)4.141em repA
AvrII (XmaJI)C^CTAGG4.251entre repA e T35
NotIGC^GGCCGC4.460entre T35 e Ubi-int''
EagI (Eco52I)C^GGCCG4.460entre T35 e Ubi-int''
MfeI (MunI)C^AATTG4.700em Ubi-int''
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG9.775entre ORF-1 e NOS-T
HindIIIA^AGCTT10.526entre DR e stop
StuI (Eco147I)AGG^CCT10.557entre stop e LacZ'

Corte duplo: EcoRI (2.121, 10.035), BamHI (2.838, 5.975), PstI (4.471, 5.972), XhoI (1.742, 5.166), NheI (5.586, 10.549), EcoRV (3.147, 8.032), SfiI (828, 10.563), BsiWI (1.187, 1.723), PvuII (682, 10.797), BsmBI (2.394, 2.728), AarI (2.432, 8.848).

Sem sítio: SalI, SphI, SpeI, MluI, PacI, SbfI, PmeI, SwaI, HpaI, BsrGI, SacII, AatII.

Calculado a partir da sequência GenBank para 50 enzimas comuns; as posições são o corte na fita superior, sem metilação Dam/Dcm. Compare vetores no localizador de sítios de restrição.

Promotor 1
UbiZm
Promotor 2
Act
Tamanho
12.628 bp, circular
Data do registro
18-MAR-2022

Construção

  • PU6C4 (sem scaffold anotado) · cassete de gRNA, 10.041–10.493

Ligation of ActmutAscBsp* into E752p7D35s-ZmUbi-Cpf1-Os4*

Extraído do arquivo GenBank; compare todos os vetores na tabela de múltiplos cassetes de expressão.

Elementos anotados

ElementoTipoInícioFimComprimentoFita
'LacZSequência codificadora CDS604825222−
LIROutro misc_feature8471.198352+
SIROutro misc_feature1.2261.382157+
LIROutro misc_feature1.3831.734352+
pActPromotor misc_feature1.7433.1401.398+
mutSítio misc_feature2.7322.7321+
mut to CCGAASítio misc_feature3.1553.1595+
repAOrigem / backbone CDS3.1603.750591+
intSítio misc_feature3.7513.83686+
repAOrigem / backbone CDS3.8374.250414+
T35Outro misc_feature4.2574.458202+
Ubi-int''Sequência codificadora CDS4.4675.9741.508+
Intron'Sítio misc_feature5.4545.973520+
KozakSítio misc_feature5.9855.9895+
ORF-1Sequência codificadora CDS5.9909.7723.783+
NLSSítio CDS5.9966.01621+
NLSSequência codificadora CDS9.7229.76948+
NOS-TTerminador misc_feature9.77810.031254+
PU6C4Promotor misc_feature10.04110.493453+
DRSítio CDS10.49410.51522+
stopSítio CDS10.54210.5487+
LacZ'Sequência codificadora CDS10.56110.63676−
ColE1Origem / backbone CDS11.03411.750717−
AmpSítio misc_feature11.793250−

PromotorSequência codificadoraTerminadorMarcador de seleçãoOrigem / backboneBorda do T-DNASítio

Os tipos de elemento são deduzidos das anotações do arquivo GenBank; o próprio arquivo é a referência.

Como citar

Cite o vetor assim na seção de Métodos (Material e Métodos).

pHC-ZmUbi-Act (E843; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/pHC-ZmUbi-Act)

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