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DNA Cloning Service
PT

RNAi

pLNU-SG

Vetor de RNAi com Ubi-maize–Spacer-Gus.

1234Ubi-intAmpSG-GliColE1IntronNOSPacI, NotI, EagIXhoI (761)BglII (1008)NcoI, ApaI, NheIClaI (1294)SpeI, BamHIEcoRV, MluI, AarIEcoRI, HindIII, AscI, SacISalI, AflIIKpnI, SwaI, StuIBbsI (3442)BsaI (3580)XmnI (4118)pLNU-SG4.495 bp

Sítios de restrição

Corte único · sítioCorta emLocalização
PacITTAAT^TAA10entre Amp e loxP
NotIGC^GGCCGC49entre loxP e Ubi-int
EagI (Eco52I)C^GGCCG49entre loxP e Ubi-int
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG761em Ubi-int
BglIIA^GATCT1.008em Ubi-int
NcoIC^CATGG1.108em Intron
ApaI (PspOMI)GGGCC^C1.121em Intron
NheI (BmtI)G^CTAGC1.181em Intron
ClaI (BspDI)AT^CGAT1.294em Intron
SpeIA^CTAGT1.571entre Ubi-int e SG-Gli
BamHIG^GATCC1.578entre Ubi-int e SG-Gli
EcoRV (Eco32I)GAT^ATC2.130em SG-Gli
MluIA^CGCGT2.168em SG-Gli
AarICACCTGC(4/8)2.175em SG-Gli
EcoRIG^AATTC2.353entre SG-Gli e NOS
HindIIIA^AGCTT2.360entre SG-Gli e NOS
AscI (SgsI)GG^CGCGCC2.367entre SG-Gli e NOS
SacI (Ecl136II)GAGCT^C2.378entre SG-Gli e NOS
SalIG^TCGAC2.381entre SG-Gli e NOS
AflII (BspTI)C^TTAAG2.416em NOS
KpnI (Acc65I)GGTAC^C2.644entre NOS e LoxP
SwaI (SmiI)ATTT^AAAT2.682entre LoxP e ColE1
StuI (Eco147I)AGG^CCT2.698entre LoxP e ColE1
BbsI (BpiI)GAAGAC(2/6)3.442entre ColE1 e Amp
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)3.580em Amp
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC4.118em Amp

Corte duplo: XbaI (94, 1.089), PstI (66, 1.567), SfiI (2.695, 4.495), MfeI (295, 1.703), NsiI (1.339, 2.507).

Sem sítio: SphI, SmaI, SbfI, FseI, PmeI, AvrII, BsiWI, AgeI, BstBI, HpaI, BsrGI, SacII, PvuII, AatII, BstEII, BsmBI, SapI.

Calculado a partir da sequência GenBank para 50 enzimas comuns; as posições são o corte na fita superior, sem metilação Dam/Dcm. Compare vetores no localizador de sítios de restrição.

Promotor 2
Ubi-maize
Gene 2
Spacer-Gus
Características
construção hairpin com espaçador, sítios Lox no cassete
Outros marcadores
Amp
Tamanho
4.495 bp, circular
Data do registro
13-JUL-2010

Construção

  • MCS · 6 sítios únicos · em 2.353, 2.416
  • SfiI ×2 · flanqueia o MCS · em 2.695, 4.495
  • AscI/PacI · um sítio de cada · em 10, 2.367

Ligation of Spacer-Gus into Lox-Ubi-Nos

Extraído do arquivo GenBank; compare todos os vetores na tabela de múltiplos cassetes de expressão.

Elementos anotados

ElementoTipoInícioFimComprimentoFita
loxPSítio misc_feature134634+
Ubi-intPromotor misc_feature621.5701.509+
IntronSítio misc_feature1.0491.568520+
SG-GliOutro misc_feature1.5812.353773+
NOSOutro misc_feature2.3872.640254+
LoxPSítio misc_feature2.6472.68034+
ColE1Origem / backbone misc_feature2.7303.396667−
AmpMarcador de seleção CDS3.4464.306861−

PromotorSequência codificadoraTerminadorMarcador de seleçãoOrigem / backboneBorda do T-DNASítio

Os tipos de elemento são deduzidos das anotações do arquivo GenBank; o próprio arquivo é a referência.

Como citar

Cite o vetor assim na seção de Métodos (Material e Métodos).

pLNU-SG (DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/rnai/pLNU-SG)

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