Zum Inhalt springen
DNA Cloning Service
DE

pUC und E.-coli-Expression

pet28-MBP-CBE-nC9-His F576

E.-coli-Expressionsvektor mit CBE.

1234567891011ORF-1ORF-1''nCas9MBPnCas9'lac\Ikan\sequenceGamApo_String2'GamApo_String1APOBEC1GAMSGGS Linker'XbaI, NcoI, BsaIBsiWI (460)SalI (1353)SacII (1717)AatII, BamHISwaI (3249)NheI (3827)XhoI (6854)SmaI (8085)ClaI (8266)SapI (9274)ApaI (11055)F576pet28-MBP-CBE-n…11.980 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

Lässt sich öffnen in SnapGene Viewer (kostenlos), Benchling, ApE und Geneious.

Restriktionsschnittstellen

Single Cutter · SchnittstelleSchneidet beiLage
XbaIT^CTAGA66zwischen lac\operator und MBP
NcoIC^CATGG105zwischen lac\operator und MBP
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)233in MBP
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG460in MBP
SalIG^TCGAC1.353in ORF-1
SacII (Cfr42I)CCGC^GG1.717in GAM
AatII (ZraI)GACGT^C2.684in SGGS Linker'
BamHIG^GATCC2.726in ORF-1
SwaI (SmiI)ATTT^AAAT3.249in nCas9'
NheI (BmtI)G^CTAGC3.827zwischen ORF-1 und 'nCas9
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG6.854zwischen ORF-1 und ORF1
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG8.085in kan\sequence
ClaI (BspDI)AT^CGAT8.266in kan\sequence
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)9.274zwischen kan\sequence und lac\I
ApaI (PspOMI)GGGCC^C11.055in lac\I

Schneiden zweimal: HindIII (3.735, 6.080), SphI (3.989, 11.791), KpnI (1.926, 4.506), BglII (529, 11.980), MluI (5.300, 11.258), BstBI (1.884, 4.066), NsiI (7.847, 8.113), PvuI (495, 7.961).

Keine Schnittstelle: NotI, SpeI, AscI, PacI, SfiI, SbfI, FseI, PmeI, AvrII, AgeI, StuI, AflII, BsrGI, EagI, AarI.

Aus der GenBank-Sequenz berechnet für 50 gängige Enzyme; Positionen bezeichnen den Schnitt im oberen Strang, ohne Dam/Dcm-Methylierung. Vektoren vergleichen in der Restriktionsschnittstellen-Suche.

Gen 2
CBE
Weitere Marker
kan\sequence
Größe
11.980 bp, zirkulär
Datum des Eintrags
01-JUN-2023

Konstrukt

  • T7 promoter–MBP–ORF-1–GamApo_String1–GAM–APOBEC1–GamApo_String2–nCas9 · Kassette mit Insert, 20–6.832

Ligation of Cas9-His* into F350pet28-MBP-CBE-nC9*

Ausgelesen aus der GenBank-Datei; alle Vektoren im Vergleich in der Tabelle Mehrere Expressionskassetten.

Annotierte Elemente

ElementTypStartEndeLängeStrang
T7 promoterSchnittstelle CDS203718+
lac\operatorSchnittstelle CDS366631+
MBPKodierende Sequenz CDS1071.3531.247+
ORF-1Kodierende Sequenz CDS1073.8273.721+
6xHis affinity tagSchnittstelle CDS11913618+
thrombin recognition and cleavage siteSchnittstelle CDS14616318+
'GamApo_String1Kodierende Sequenz CDS1.3542.054701+
TEVSchnittstelle misc_feature1.3611.38121+
GAMKodierende Sequenz CDS1.3821.952571+
APOBEC1Kodierende Sequenz CDS1.9532.636684+
GamApo_String2Kodierende Sequenz CDS2.0252.726702+
SGGS Linker'Kodierende Sequenz CDS2.6362.72691+
nCas9'Kodierende Sequenz CDS2.7333.8271.095+
D10ASchnittstelle misc_feature2.7562.7583+
''nCas9Kodierende Sequenz CDS3.8286.8313.004+
ORF-1Kodierende Sequenz CDS3.8286.8323.005+
'ORF1Schnittstelle CDS6.8556.88026+
His-TagSchnittstelle CDS6.8606.87718+
StopSchnittstelle CDS6.8786.8803+
kan\sequenceSelektionsmarker CDS7.5798.391813−
lac\IKodierende Sequenz CDS10.53411.6131.080−

PromotorKodierende SequenzTerminatorSelektionsmarkerOrigin / BackboneT-DNA-Grenze (Border)Schnittstelle

Die Elementtypen werden aus den Bezeichnungen in der GenBank-Datei abgeleitet; maßgeblich ist die Datei selbst.

Zitierweise

Bitte zitieren Sie den Vektor im Methodenteil wie folgt.

pet28-MBP-CBE-nC9-His (F576; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/pet28-MBP-CBE-nC9-His)

Ihre Publikation verwendet einen unserer Vektoren? Schreiben Sie uns.