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DNA Cloning Service
ES

CRISPR/Cas

pHC-nCas9-UGI F190

Vector CRISPR/Cas con Cas9 nick.

123456'Cas9WTORF-1'Cas9WTColE1UGIUGINLSSpeI, SacIBglII (382)AatII (673)SapI (1285)NcoI (1554)StuI (2851)SphI (3398)SalI, ApaISmaI (4859)XmnI (5139)PvuI (5370)F190pHC-nCas9-UGI6479 bp

Sitios de restricción

Corte único · sitioCorta enUbicación
SpeIA^CTAGT69entre O1 y Cas9WT
SacI (Ecl136II)GAGCT^C131en Cas9WT
BglIIA^GATCT382en Cas9WT
AatII (ZraI)GACGT^C673en Cas9WT
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)1285en Cas9WT
NcoIC^CATGG1554en Cas9WT
StuI (Eco147I)AGG^CCT2851en Cas9WT
SphI (PaeI)GCATG^C3398entre los dos Cas9WT
SalIG^TCGAC4688en UGI
ApaI (PspOMI)GGGCC^C4748en UGI
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG4859entre NLS y O2
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC5139en ORF-1
PvuICGAT^CG5370en ORF-1

Corte doble: BamHI (75, 4242), EcoRV (1973, 4931), SacII (626, 2723).

Sin sitio: EcoRI, HindIII, XbaI, PstI, KpnI, NotI, XhoI, NdeI, NheI, ClaI, MluI, AscI, PacI, SfiI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, MfeI, AgeI, BstBI, HpaI, NsiI, BsrGI, EagI, BstEII, BsaI, BbsI, BsmBI, AarI.

Calculado a partir de la secuencia GenBank para 50 enzimas comunes; las posiciones son el corte en la hebra superior, sin metilación Dam/Dcm. Compare vectores en el buscador de sitios de restricción.

Gen 2
Cas9 nick
Tamaño
6479 bp, circular
Fecha del registro
01-SEP-2022

Ligation of C9UGI-Sph-Xma* into F189pHC-nCas9*

Elementos anotados

ElementoTipoInicioFinLongitudHebra
O1Sitio CDS305021+
'Cas9WTSecuencia codificante CDS12033983279+
D10ASitio misc_feature1601601+
'Cas9WTSecuencia codificante CDS33994235837+
UGISecuencia codificante CDS42664514249+
LinkerSitio misc_feature4515454430+
UGISecuencia codificante CDS45454793249+
LinkerSitio misc_feature4794480512+
NLSSecuencia codificante CDS4806485348+
O2Sitio CDS4877489721+
ORF-1Secuencia codificante CDS49525812861+
ColE1Origen / backbone misc_feature58156479665+
LCSitio misc_feature603760371+

PromotorSecuencia codificanteTerminadorMarcador de selecciónOrigen / backboneBorde del T-DNASitio

Los tipos de elemento se deducen de las anotaciones del archivo GenBank; la referencia es el propio archivo.

Cómo citar

Cite el vector así en la sección de Materiales y métodos.

pHC-nCas9-UGI (F190; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/crispr/pHC-nCas9-UGI)

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