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DNA Cloning Service
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Binaires

p7D35s-UbiAtGFP C244

Vecteur binaire avec 35s–bar et Ubq10–EGFP, pour les dicotylédones.

123456789''pVS1 ORI'''Pro-Ubq10Atstrep/spec'ColE1''Right Border Region35SGFPGFP''Bar'íntron'E9Bar'OCSSTLS1ST-LS1Ubi cds 5`LB'RBXhoI, BsaIAarI (1128)PstI, SbfI, NotI, SpeIBamHI, SmaIEcoRI (2350)SacI, SapIHindIII (3168)BstBI (3531)ClaI (3762)BsmBI (4120)PmeI, SphIAatII (4765)BstEII (8177)C244p7D35s-UbiAtGFP9 027 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG587entre 35S et Bar'
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)686dans Bar'
AarICACCTGC(4/8)1 128dans 'Bar'
PstICTGCA^G1 656entre E9 et Pro-Ubq10At
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG1 656entre E9 et Pro-Ubq10At
NotIGC^GGCCGC1 665entre E9 et Pro-Ubq10At
SpeIA^CTAGT1 672entre E9 et Pro-Ubq10At
BamHIG^GATCC1 678entre E9 et Pro-Ubq10At
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG1 686entre E9 et Pro-Ubq10At
EcoRIG^AATTC2 350dans Pro-Ubq10At
SacI (Ecl136II)GAGCT^C2 783dans Pro-Ubq10At
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)2 788dans Pro-Ubq10At
HindIIIA^AGCTT3 168entre Pro-Ubq10At et GFP
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA3 531dans GFP
ClaI (BspDI)AT^CGAT3 762dans GFP
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)4 120dans OCS
PmeI (MssI)GTTT^AAAC4 374dans Right Border Region
SphI (PaeI)GCATG^C4 499dans Right Border Region
AatII (ZraI)GACGT^C4 765dans Right Border Region
BstEII (Eco91I)G^GTNACC8 177dans strep/spec

Double coupure : SalI (2 528, 4 100), KpnI (3 412, 4 342), BglII (3 095, 4 320), MluI (1 346, 3 174), SfiI (1 664, 4 314), StuI (1 658, 4 308), EagI (1 665, 4 756), SacII (1 228, 1 245).

Aucun site : NcoI, NdeI, NheI, AscI, PacI, FseI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, NsiI, AflII, BsrGI, PvuII.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 1
35s
Gène 1
bar
Promoteur 2
Ubq10
Gène 2
EGFP
Caractéristiques
dicotylédones
Autres marqueurs
Bar', 'Bar', strep/spec
Taille
9 027 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
11-JAN-2017

Construction

  • 35S–Bar · E9 · cassette de sélection, 169–1 646
  • Pro-Ubq10At–GFP · OCS · cassette avec insert, 1 690–4 300
  • MCS · 6 sites uniques · en 1 656, 1 686
  • SfiI ×2 · encadre la cassette Pro-Ubq10At–GFP · en 1 664, 4 314
  • Bordures de l’ADN-T · LB, RB

Ligation of B592pUbiAt-mGFPD-ocs* into C243p7D35s*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
LB'Bordure de l’ADN-T misc_feature12424+
35SPromoteur misc_feature169584416+
Bar'Marqueur de sélection CDS605838234+
STLS1Autre misc_feature8391 027189+
''Bar'Marqueur de sélection CDS1 0281 343316+
'E9Terminateur misc_feature1 3561 646291+
Pro-Ubq10AtPromoteur misc_feature1 6903 1651 476+
TATASite misc_feature2 7612 7644+
Ubi cds 5`Séquence codante CDS2 7942 85764+
íntronAutre misc_feature2 8603 163304+
GFPSéquence codante CDS3 1913 569379+
ST-LS1Autre misc_feature3 5703 758189+
GFPSéquence codante CDS3 7594 096338+
OCSTerminateur misc_feature4 1054 300196+
Right Border RegionAutre misc_feature4 3454 947603+
RBBordure de l’ADN-T misc_feature4 3904 41324+
'ColE1''Origine / squelette misc_feature4 9615 619659+
''pVS1 ORI'''Origine / squelette misc_feature5 6487 6111 964+
strep/specMarqueur de sélection CDS7 8008 8101 011+
Left Border RegionBordure de l’ADN-T misc_feature8 8781630+

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

p7D35s-UbiAtGFP (C244; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/binaries/p7D35s-UbiAtGFP; RRID:SCR_029231)

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