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DNA Cloning Service
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CRISPR/Cas

pU6pp-LbCpf1 D054

Vecteur CRISPR/Cas avec LbCPf1.

1234567ORF-1Ubi-intColE1IntronU6 PpNOS-TNLSMfeI (331)XhoI (797)BglII, NcoI, ApaI, NheIBamHI (1610)SacI (3903)AarI (4483)SmaI (5410)EcoRI (5670)PvuII (5858)HindIII, SalIBsaI (6896)D054pU6pp-LbCpf17 597 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
MfeI (MunI)C^AATTG331dans Ubi-int
XhoI (PaeR7I)C^TCGAG797dans Ubi-int
BglIIA^GATCT1 044dans Ubi-int
NcoIC^CATGG1 144dans Intron
ApaI (PspOMI)GGGCC^C1 157dans Intron
NheI (BmtI)G^CTAGC1 217dans Intron
BamHIG^GATCC1 610entre Ubi-int et ORF-1
SacI (Ecl136II)GAGCT^C3 903dans ORF-1
AarICACCTGC(4/8)4 483dans ORF-1
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG5 410entre ORF-1 et NOS-T
EcoRIG^AATTC5 670entre NOS-T et U6 Pp
PvuIICAG^CTG5 858dans U6 Pp
HindIIIA^AGCTT6 027entre DR et ColE1
SalIG^TCGAC6 044entre DR et ColE1
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)6 896dans Amp

Double coupure : XbaI (130, 1 125), PstI (102, 1 603), SfiI (87, 6 058), StuI (81, 6 052), NsiI (1 375, 5 533), BstEII (2 800, 4 589), BsmBI (6 011, 6 043).

Aucun site : SphI, KpnI, NotI, SpeI, MluI, AscI, PacI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, BsrGI, EagI, SacII, AatII, BbsI.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 1
U6
Gène 2
LbCPf1
Taille
7 597 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
14-NOV-2018

Construction

  • Ubi-int–ORF-1 · NOS-T · cassette avec insert, 98–5 666
  • U6 Pp (aucun scaffold annoté) · cassette ARNg, 5 676–5 994

Ligation of TargetCpf1_EcoSal* into D042pUbiZmU6pp-Cpf1*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
Ubi-intPromoteur misc_feature981 6061 509+
IntronSite misc_feature1 0851 604520+
ORF-1Séquence codante CDS1 6255 4073 783+
NLSSite misc_feature1 6311 65121+
NLSSite misc_feature5 3575 40448+
NOS-TTerminateur misc_feature5 4135 666254+
U6 PpPromoteur misc_feature5 6765 994319+
DRSite misc_feature5 9966 01621+
ColE1Origine / squelette misc_feature6 0956 759665−
AmpSite misc_feature6 760250−

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

pU6pp-LbCpf1 (D054; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/crispr/pU6pp-LbCpf1)

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