Aller au contenu
DNA Cloning Service
FR

pUC et expression chez E. coli

pNos-Act E985

Vecteur de clonage pUC.

1234pActAmpColE1mRNAintronNOS-T'OCSXbaI (79)AarI (1048)FseI (1121)BstEII (1291)SpeI, SmaI, PstI, HindIIIMluI, SalIStuI, SfiI, ApaI, KpnIXmnI (3002)SapI (4607)E985pNos-Act4 815 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

S’ouvre dans SnapGene Viewer (gratuit), Benchling, ApE et Geneious.

Sites de restriction

Enzyme à coupure unique · siteCoupe enEmplacement
XbaIT^CTAGA79entre ColE1 et NOS-T'
AarICACCTGC(4/8)1 048dans AT reich
FseIGGCCGG^CC1 121dans pAct
BstEII (Eco91I)G^GTNACC1 291dans mRNA
SpeIA^CTAGT1 756entre pAct et OCS
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG1 771entre pAct et OCS
PstICTGCA^G1 779entre pAct et OCS
HindIIIA^AGCTT1 787entre pAct et OCS
MluIA^CGCGT1 793entre pAct et OCS
SalIG^TCGAC1 799entre pAct et OCS
StuI (Eco147I)AGG^CCT2 007entre OCS et Amp
SfiIGGCCNNNN^NGGCC2 013entre OCS et Amp
ApaI (PspOMI)GGGCC^C2 030entre OCS et Amp
KpnI (Acc65I)GGTAC^C2 036entre OCS et Amp
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC3 002dans Amp
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)4 607entre ColE1 et NOS-T'

Double coupure : EcoRI (737, 1 781), BamHI (1 454, 1 763), SacI (77, 1 258), NdeI (371, 692), NsiI (209, 607), AflII (118, 2 009), PvuII (2 157, 4 670), BsaI (1 350, 3 536).

Aucun site : SphI, NotI, XhoI, NcoI, NheI, ClaI, EcoRV, AscI, PacI, SbfI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, MfeI, AgeI, BstBI, HpaI, BsrGI, EagI, SacII, AatII, BbsI.

Calculé à partir de la séquence GenBank pour 50 enzymes courantes ; les positions correspondent à la coupure sur le brin supérieur, sans méthylation Dam/Dcm. Comparez les vecteurs dans la recherche de sites de restriction.

Promoteur 1
Nos
Promoteur 2
Act
Autres marqueurs
Amp
Taille
4 815 bp, circulaire
Date de l’enregistrement
16-FEB-2022

Construction

  • pAct–(vide)–OCS · cassette d’expression vide, 359–1 999
  • MCS · 6 sites uniques · en 1 756, 1 799

Ligation of nos-Xba-Bsa* into B627pAct-ocs*

Extrait du fichier GenBank ; comparez tous les vecteurs dans le tableau des cassettes d’expression multiples.

Éléments annotés

ÉlémentTypeDébutFinLongueurBrin
NOS-T'Terminateur misc_feature89337249+
pActPromoteur misc_feature3591 7561 398+
AT reichSite CDS1 0161 05439+
mRNASéquence codante CDS1 2021 756555+
intronSite CDS1 2921 753462+
OCSTerminateur misc_feature1 8041 999196+
AmpMarqueur de sélection misc_feature2 8153 675861+
ColE1Origine / squelette misc_feature3 7184 434717+

PromoteurSéquence codanteTerminateurMarqueur de sélectionOrigine / squeletteBordure de l’ADN-TSite

Les types d’éléments sont déduits des étiquettes du fichier GenBank ; c’est le fichier lui-même qui fait référence.

Comment citer

Citez le vecteur ainsi dans la partie Matériel et méthodes.

pNos-Act (E985; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/pNos-Act)

Votre article utilise l’un de nos vecteurs ? Dites-le-nous.