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DNA Cloning Service
PT

pUC e expressão em E. coli

pNos-Act E985

Vetor de clonagem pUC.

1234pActAmpColE1mRNAintronNOS-T'OCSXbaI (79)AarI (1048)FseI (1121)BstEII (1291)SpeI, SmaI, PstI, HindIIIMluI, SalIStuI, SfiI, ApaI, KpnIXmnI (3002)SapI (4607)E985pNos-Act4.815 bp

Sítios de restrição

Corte único · sítioCorta emLocalização
XbaIT^CTAGA79entre ColE1 e NOS-T'
AarICACCTGC(4/8)1.048em AT reich
FseIGGCCGG^CC1.121em pAct
BstEII (Eco91I)G^GTNACC1.291em mRNA
SpeIA^CTAGT1.756entre pAct e OCS
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG1.771entre pAct e OCS
PstICTGCA^G1.779entre pAct e OCS
HindIIIA^AGCTT1.787entre pAct e OCS
MluIA^CGCGT1.793entre pAct e OCS
SalIG^TCGAC1.799entre pAct e OCS
StuI (Eco147I)AGG^CCT2.007entre OCS e Amp
SfiIGGCCNNNN^NGGCC2.013entre OCS e Amp
ApaI (PspOMI)GGGCC^C2.030entre OCS e Amp
KpnI (Acc65I)GGTAC^C2.036entre OCS e Amp
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC3.002em Amp
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)4.607entre ColE1 e NOS-T'

Corte duplo: EcoRI (737, 1.781), BamHI (1.454, 1.763), SacI (77, 1.258), NdeI (371, 692), NsiI (209, 607), AflII (118, 2.009), PvuII (2.157, 4.670), BsaI (1.350, 3.536).

Sem sítio: SphI, NotI, XhoI, NcoI, NheI, ClaI, EcoRV, AscI, PacI, SbfI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, MfeI, AgeI, BstBI, HpaI, BsrGI, EagI, SacII, AatII, BbsI.

Calculado a partir da sequência GenBank para 50 enzimas comuns; as posições são o corte na fita superior, sem metilação Dam/Dcm. Compare vetores no localizador de sítios de restrição.

Promotor 1
Nos
Promotor 2
Act
Outros marcadores
Amp
Tamanho
4.815 bp, circular
Data do registro
16-FEB-2022

Construção

  • pAct–(vazio)–OCS · cassete de expressão vazio, 359–1.999
  • MCS · 6 sítios únicos · em 1.756, 1.799

Ligation of nos-Xba-Bsa* into B627pAct-ocs*

Extraído do arquivo GenBank; compare todos os vetores na tabela de múltiplos cassetes de expressão.

Elementos anotados

ElementoTipoInícioFimComprimentoFita
NOS-T'Terminador misc_feature89337249+
pActPromotor misc_feature3591.7561.398+
AT reichSítio CDS1.0161.05439+
mRNASequência codificadora CDS1.2021.756555+
intronSítio CDS1.2921.753462+
OCSTerminador misc_feature1.8041.999196+
AmpMarcador de seleção misc_feature2.8153.675861+
ColE1Origem / backbone misc_feature3.7184.434717+

PromotorSequência codificadoraTerminadorMarcador de seleçãoOrigem / backboneBorda do T-DNASítio

Os tipos de elemento são deduzidos das anotações do arquivo GenBank; o próprio arquivo é a referência.

Como citar

Cite o vetor assim na seção de Métodos (Material e Métodos).

pNos-Act (E985; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/pNos-Act)

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