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DNA Cloning Service
PT

Binários

p6o2x35s-UbiZm-LGFP C192

Vetor binário com 2x35s–hptII e UbiZm–link-EGFP, para monocotiledôneas.

24681012pVS1UbiSm/SpP2x35sColE1hptIIIntronhptIIGFPmGFPmE9OCSintIntlinkLBRBSbfI (2648)NsiI (3970)SpeI, BamHI, SmaI, EcoRIHindIII, MluI, BsrGIBstBI (4642)SalI (5212)AflII, KpnI, PmeIAatII (5872)BsiWI (10086)C192p6o2x35s-Ubi12.720 bp

Sítios de restrição

Corte único · sítioCorta emLocalização
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG2.648entre E9 e Ubi
NsiI (Mph1103I)ATGCA^T3.970em Intron
SpeIA^CTAGT4.202entre Ubi e link
BamHIG^GATCC4.209entre Ubi e link
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG4.217entre Ubi e link
EcoRIG^AATTC4.227entre Ubi e link
HindIIIA^AGCTT4.233entre Ubi e link
MluIA^CGCGT4.239entre Ubi e link
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA4.245entre Ubi e link
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA4.642em GFPm
SalIG^TCGAC5.212entre GFPm e OCS
AflII (BspTI)C^TTAAG5.422entre OCS e RB
KpnI (Acc65I)GGTAC^C5.449entre OCS e RB
PmeI (MssI)GTTT^AAAC5.481entre OCS e RB
AatII (ZraI)GACGT^C5.872entre RB e ColE1
BsiWI (Pfl23II)C^GTACG10.086em pVS1

Corte duplo: SphI (2.654, 5.606), XhoI (1.098, 3.392), NcoI (2.674, 3.739), NheI (3.812, 10.202), BglII (3.639, 5.432), EcoRV (966, 5.993), ApaI (3.752, 5.443), SfiI (2.679, 5.426), FseI (7.753, 9.858), AgeI (10.696, 11.004), StuI (2.012, 5.420), SacII (1.486, 2.316), BstEII (1.406, 11.567), SapI (6.925, 10.822).

Sem sítio: SacI, AscI, PacI, SwaI, AvrII, HpaI, PvuII, AarI.

Calculado a partir da sequência GenBank para 50 enzimas comuns; as posições são o corte na fita superior, sem metilação Dam/Dcm. Compare vetores no localizador de sítios de restrição.

Promotor 1
2x35s
Gene 1
hptII
Promotor 2
UbiZm
Gene 2
link-EGFP
Características
monocotiledôneas
Outros marcadores
Sm/Sp
Tamanho
12.720 bp, circular
Data do registro
29-SEP-2017

Construção

  • P2x35s–hptII · E9 · cassete de seleção, 314–2.638
  • Ubi–GFPm · OCS · cassete com inserto, 2.693–5.412
  • MCS · 7 sítios únicos · em 4.202, 4.245
  • SfiI ×2 · flanqueia o cassete Ubi–GFPm · em 2.679, 5.426
  • Bordas do T-DNA · LB, RB

Ligation of B633pUbiZm-LGFP* into B483p6o2x35s-LH*

Extraído do arquivo GenBank; compare todos os vetores na tabela de múltiplos cassetes de expressão.

Elementos anotados

ElementoTipoInícioFimComprimentoFita
LBBorda do T-DNA misc_feature12424+
P2x35sPromotor misc_feature3141.098785+
hptIIMarcador de seleção CDS1.1161.685570+
intSítio misc_feature1.6861.874189+
hptIIMarcador de seleção CDS1.8752.330456+
E9Terminador misc_feature2.3482.638291+
UbiPromotor misc_feature2.6934.2011.509+
IntronSítio misc_feature3.6804.199520+
linkSítio misc_feature4.2514.30151+
GFPmSequência codificadora CDS4.3024.680379+
IntSítio CDS4.6814.869189+
GFPmSequência codificadora CDS4.8705.207338+
OCSTerminador misc_feature5.2175.412196+
RBBorda do T-DNA misc_feature5.4975.52024+
ColE1Origem / backbone misc_feature6.0556.752698+
pVS1Origem / backbone misc_feature7.30111.0063.706+
Sm/SpMarcador de seleção CDS11.19012.2001.011+

PromotorSequência codificadoraTerminadorMarcador de seleçãoOrigem / backboneBorda do T-DNASítio

Os tipos de elemento são deduzidos das anotações do arquivo GenBank; o próprio arquivo é a referência.

Como citar

Cite o vetor assim na seção de Métodos (Material e Métodos).

p6o2x35s-UbiZm-LGFP (C192; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/binaries/p6o2x35s-UbiZm-LGFP)

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