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DNA Cloning Service
PT

CRISPR/Cas

p9M2x35s-ZmUbi-Cpf1TS G799

Vetor CRISPR/Cas com 2x35s–nptII e UbiZm–LbCPf1, para monocotiledôneas.

24681012ORF-1''pVS1 ORI'''Ubi-int''ParBstrep/specP2x35s''ColE1''Right Border RegionIntron'NptIIo'PU6C4NptIIo''E9NOS-TintronNLSLB'RBSbfI, NotINcoI (3348)BamHI (3810)SmaI (7610)EcoRI (7870)HindIII, KpnI, PmeI, SphIAatII (8849)G799p9M2x35s-ZmUbi-…13.111 bp

Sítios de restrição

Corte único · sítioCorta emLocalização
SbfI (SdaI)CCTGCA^GG2.286entre 'E9 e Ubi-int''
NotIGC^GGCCGC2.295entre 'E9 e Ubi-int''
NcoIC^CATGG3.348em Intron'
BamHIG^GATCC3.810entre Ubi-int'' e Kozak
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG7.610entre ORF-1 e NOS-T
EcoRIG^AATTC7.870entre NOS-T e PU6C4
HindIIIA^AGCTT8.361entre DR e stop
KpnI (Acc65I)GGTAC^C8.426entre LacZ' e Right Border Region
PmeI (MssI)GTTT^AAAC8.458em Right Border Region
SphI (PaeI)GCATG^C8.583em Right Border Region
AatII (ZraI)GACGT^C8.849em Right Border Region

Corte duplo: SacI (1.486, 6.103), XhoI (958, 3.001), NheI (3.421, 8.384), BglII (3.248, 8.404), SfiI (2.294, 8.398), StuI (2.288, 8.392), NsiI (3.579, 7.733), EagI (2.295, 8.840), BsaI (8.345, 8.377).

Sem sítio: SalI, SpeI, MluI, AscI, PacI, FseI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, BsrGI, SacII, PvuII, BsmBI.

Calculado a partir da sequência GenBank para 50 enzimas comuns; as posições são o corte na fita superior, sem metilação Dam/Dcm. Compare vetores no localizador de sítios de restrição.

Promotor 1
2x35s
Gene 1
nptII
Promotor 2
UbiZm
Gene 2
LbCPf1
Características
monocotiledôneas
Outros marcadores
NptIIo, NptIIo', strep/spec
Tamanho
13.111 bp, circular
Data do registro
24-JUN-2025

Construção

  • P2x35s–NptIIo · E9 · cassete de seleção, 174–2.276
  • PU6C4 (sem scaffold anotado) · cassete de gRNA, 7.876–8.328
  • SfiI ×2 · flanqueia o cassete PU6C4 (no scaffold annotated) · em 2.294, 8.398
  • Bordas do T-DNA · LB, RB

Ligation of G798pD35s-ZmUbi-Cpf1TS* into F652p9M2x35s_cut*

Extraído do arquivo GenBank; compare todos os vetores na tabela de múltiplos cassetes de expressão.

Elementos anotados

ElementoTipoInícioFimComprimentoFita
LB'Borda do T-DNA misc_feature12424+
P2x35s'Promotor misc_feature174958785+
NptIIoMarcador de seleção CDS9761.274299+
intronSítio CDS1.2751.461187+
NptIIo'Marcador de seleção CDS1.4621.965504+
Change to TSítio misc_feature1.6231.6231+
''E9Terminador misc_feature1.9872.276290+
Ubi-int''Sequência codificadora CDS2.3023.8091.508+
Intron'Sítio misc_feature3.2893.808520+
Kozak Sítio misc_feature3.8203.8245+
ORF-1Sequência codificadora CDS3.8257.6073.783+
NLSSítio misc_feature3.8313.85121+
D172RSítio misc_feature4.3384.3403+
NLSSequência codificadora CDS7.5577.60448+
NOS-TTerminador misc_feature7.6137.866254+
PU6C4Promotor misc_feature7.8768.328453+
DRSítio CDS8.3298.35022+
stopSítio CDS8.3778.3837+
LacZ'Sítio CDS8.3968.3983−
Right Border RegionOutro misc_feature8.4299.031603+
RBBorda do T-DNA misc_feature8.4748.49724+
'ColE1''Origem / backbone misc_feature9.0459.703659+
''pVS1 ORI'''Origem / backbone misc_feature9.73211.6951.964+
ParBSequência codificadora CDS10.05811.2331.176+
strep/specMarcador de seleção CDS11.88412.8941.011+
Left Border RegionBorda do T-DNA misc_feature12.9621630+

PromotorSequência codificadoraTerminadorMarcador de seleçãoOrigem / backboneBorda do T-DNASítio

Os tipos de elemento são deduzidos das anotações do arquivo GenBank; o próprio arquivo é a referência.

Como citar

Cite o vetor assim na seção de Métodos (Material e Métodos).

p9M2x35s-ZmUbi-Cpf1TS (G799; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/crispr/p9M2x35s-ZmUbi-Cpf1TS)

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