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DNA Cloning Service
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CRISPR/Cas

pHC-nCas9 F189

CRISPR/Cas-Vektor mit Cas9 nick.

12345'Cas9WTORF-1ColE1NLSSpeI, BamHI, SacIBglII (382)AatII (673)SapI (1285)NcoI (1554)StuI (2851)SphI (3398)SmaI (4289)XmnI (4569)PvuI (4800)F189pHC-nCas95.909 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

Lässt sich öffnen in SnapGene Viewer (kostenlos), Benchling, ApE und Geneious.

Restriktionsschnittstellen

Single Cutter · SchnittstelleSchneidet beiLage
SpeIA^CTAGT69zwischen O1 und Cas9WT
BamHIG^GATCC75zwischen O1 und Cas9WT
SacI (Ecl136II)GAGCT^C131in Cas9WT
BglIIA^GATCT382in Cas9WT
AatII (ZraI)GACGT^C673in Cas9WT
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)1.285in Cas9WT
NcoIC^CATGG1.554in Cas9WT
StuI (Eco147I)AGG^CCT2.851in Cas9WT
SphI (PaeI)GCATG^C3.398in Cas9WT
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG4.289zwischen Cas9WT und O2
XmnI (PdmI)GAANN^NNTTC4.569in ORF-1
PvuICGAT^CG4.800in ORF-1

Schneiden zweimal: EcoRV (1.973, 4.361), SacII (626, 2.723).

Keine Schnittstelle: EcoRI, HindIII, XbaI, SalI, PstI, KpnI, NotI, XhoI, NdeI, NheI, ClaI, ApaI, MluI, AscI, PacI, SfiI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, MfeI, AgeI, BstBI, HpaI, NsiI, BsrGI, EagI, BstEII, BsaI, BbsI, BsmBI, AarI.

Aus der GenBank-Sequenz berechnet für 50 gängige Enzyme; Positionen bezeichnen den Schnitt im oberen Strang, ohne Dam/Dcm-Methylierung. Vektoren vergleichen in der Restriktionsschnittstellen-Suche.

Gen 2
Cas9 nick
Größe
5.909 bp, zirkulär
Datum des Eintrags
17-AUG-2022

Ligation of F188p7D35s-C9Nick* into HC5-Spe-Xma*

Annotierte Elemente

ElementTypStartEndeLängeStrang
O1Schnittstelle CDS305021+
'Cas9WTKodierende Sequenz CDS1204.2864.167+
D10ASchnittstelle misc_feature1601601+
NLSSchnittstelle misc_feature4.2364.28348+
O2Schnittstelle CDS4.3074.32721+
ORF-1Kodierende Sequenz CDS4.3825.242861+
ColE1Origin / Backbone misc_feature5.2455.909665+
LCSchnittstelle misc_feature5.4675.4671+

PromotorKodierende SequenzTerminatorSelektionsmarkerOrigin / BackboneT-DNA-Grenze (Border)Schnittstelle

Die Elementtypen werden aus den Bezeichnungen in der GenBank-Datei abgeleitet; maßgeblich ist die Datei selbst.

Zitierweise

Bitte zitieren Sie den Vektor im Methodenteil wie folgt.

pHC-nCas9 (F189; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/crispr/pHC-nCas9; RRID:SCR_029231)

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