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DNA Cloning Service
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pUC und E.-coli-Expression

p35s-LmEGFP D360

pUC-Klonierungsvektor mit 35s–mEGFP, für Monokotyle und Dikotyle.

1234AmpColE135S-PromEGFPmEGFPOCSST-LS1SacI, XbaI, NcoI, NotIEagI (93)EcoRV (434)SpeI, BamHI, SmaI, PstIEcoRI, HindIII, MluI, BsrGIBstBI (967)MfeI (1112)ClaI (1198)SalI, BsmBIStuI, AflII, BglII, ApaIKpnI (1774)BsaI (3274)SapI (4345)D360p35s-LmEGFP4.553 bp

GenBank (.gbk)SnapGene (.dna)FASTA.seq

Lässt sich öffnen in SnapGene Viewer (kostenlos), Benchling, ApE und Geneious.

Restriktionsschnittstellen

Single Cutter · SchnittstelleSchneidet beiLage
SacI (Ecl136II)GAGCT^C77zwischen ColE1 und 35S-Pro
XbaIT^CTAGA79zwischen ColE1 und 35S-Pro
NcoIC^CATGG87zwischen ColE1 und 35S-Pro
NotIGC^GGCCGC93zwischen ColE1 und 35S-Pro
EagI (Eco52I)C^GGCCG93zwischen ColE1 und 35S-Pro
EcoRV (Eco32I)GAT^ATC434in 35S-Pro
SpeIA^CTAGT527in 35S-Pro
BamHIG^GATCC534zwischen 35S-Pro und mEGFP
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG542zwischen 35S-Pro und mEGFP
PstICTGCA^G550zwischen 35S-Pro und mEGFP
EcoRIG^AATTC552zwischen 35S-Pro und mEGFP
HindIIIA^AGCTT558zwischen 35S-Pro und mEGFP
MluIA^CGCGT564zwischen 35S-Pro und mEGFP
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA570zwischen 35S-Pro und mEGFP
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA967in mEGFP
MfeI (MunI)C^AATTG1.112in ST-LS1
ClaI (BspDI)AT^CGAT1.198in mEGFP
SalIG^TCGAC1.537zwischen mEGFP und OCS
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)1.557in OCS
StuI (Eco147I)AGG^CCT1.745zwischen OCS und Amp
AflII (BspTI)C^TTAAG1.747zwischen OCS und Amp
BglIIA^GATCT1.757zwischen OCS und Amp
ApaI (PspOMI)GGGCC^C1.768zwischen OCS und Amp
KpnI (Acc65I)GGTAC^C1.774zwischen OCS und Amp
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)3.274in Amp
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)4.345zwischen ColE1 und 35S-Pro

Schneiden zweimal: SfiI (92, 1.751), PvuI (1.926, 2.971), PvuII (1.895, 4.408), XmnI (394, 2.740).

Keine Schnittstelle: SphI, XhoI, NdeI, NheI, AscI, PacI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, NsiI, SacII, AatII, BstEII, AarI.

Aus der GenBank-Sequenz berechnet für 50 gängige Enzyme; Positionen bezeichnen den Schnitt im oberen Strang, ohne Dam/Dcm-Methylierung. Vektoren vergleichen in der Restriktionsschnittstellen-Suche.

Promotor 1
35s
Gen 1
mEGFP
Merkmale
Dikotyle und Monokotyle
Weitere Marker
Amp
Größe
4.553 bp, zirkulär
Datum des Eintrags
26-AUG-2020

Konstrukt

  • 35S-Pro–mEGFP · OCS · Kassette mit Insert, 106–1.737
  • MCS · 8 Single-Cutter-Schnittstellen · Pos. 527, 570
  • SfiI ×2 · flankiert die Kassette 35S-Pro–mEGFP · Pos. 92, 1.751

Ligation of GFP-Hind-Sal* into B629p35s-LGFP*

Ausgelesen aus der GenBank-Datei; alle Vektoren im Vergleich in der Tabelle Mehrere Expressionskassetten.

Annotierte Elemente

ElementTypStartEndeLängeStrang
35S-ProPromotor misc_feature106528423+
TATASchnittstelle CDS4945007+
mEGFPKodierende Sequenz CDS6271.005379+
F64L/S65T - enhanced fluorescenceSchnittstelle misc_feature8168216+
ST-LS1Kodierende Sequenz CDS1.0061.194189+
mEGFPKodierende Sequenz CDS1.1951.532338+
A206K - monomeric proteinSchnittstelle misc_feature1.4311.4333+
OCSTerminator misc_feature1.5421.737196+
AmpSelektionsmarker misc_feature2.5533.413861+
ColE1Origin / Backbone misc_feature3.4564.172717+

PromotorKodierende SequenzTerminatorSelektionsmarkerOrigin / BackboneT-DNA-Grenze (Border)Schnittstelle

Die Elementtypen werden aus den Bezeichnungen in der GenBank-Datei abgeleitet; maßgeblich ist die Datei selbst.

Zitierweise

Bitte zitieren Sie den Vektor im Methodenteil wie folgt.

p35s-LmEGFP (D360; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/p35s-LmEGFP; RRID:SCR_029231)

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