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DNA Cloning Service
ES

pUC y expresión en E. coli

p35s-LmEGFP D360

Vector de clonación pUC con 35s–mEGFP, para monocotiledóneas y dicotiledóneas.

1234AmpColE135S-PromEGFPmEGFPOCSST-LS1SacI, XbaI, NcoI, NotIEagI (93)EcoRV (434)SpeI, BamHI, SmaI, PstIEcoRI, HindIII, MluI, BsrGIBstBI (967)MfeI (1112)ClaI (1198)SalI, BsmBIStuI, AflII, BglII, ApaIKpnI (1774)BsaI (3274)SapI (4345)D360p35s-LmEGFP4553 bp

Sitios de restricción

Corte único · sitioCorta enUbicación
SacI (Ecl136II)GAGCT^C77entre ColE1 y 35S-Pro
XbaIT^CTAGA79entre ColE1 y 35S-Pro
NcoIC^CATGG87entre ColE1 y 35S-Pro
NotIGC^GGCCGC93entre ColE1 y 35S-Pro
EagI (Eco52I)C^GGCCG93entre ColE1 y 35S-Pro
EcoRV (Eco32I)GAT^ATC434en 35S-Pro
SpeIA^CTAGT527en 35S-Pro
BamHIG^GATCC534entre 35S-Pro y mEGFP
SmaI (XmaI, TspMI)CCC^GGG542entre 35S-Pro y mEGFP
PstICTGCA^G550entre 35S-Pro y mEGFP
EcoRIG^AATTC552entre 35S-Pro y mEGFP
HindIIIA^AGCTT558entre 35S-Pro y mEGFP
MluIA^CGCGT564entre 35S-Pro y mEGFP
BsrGI (Bsp1407I)T^GTACA570entre 35S-Pro y mEGFP
BstBI (Bsp119I)TT^CGAA967en mEGFP
MfeI (MunI)C^AATTG1112en ST-LS1
ClaI (BspDI)AT^CGAT1198en mEGFP
SalIG^TCGAC1537entre mEGFP y OCS
BsmBI (Esp3I)CGTCTC(1/5)1557en OCS
StuI (Eco147I)AGG^CCT1745entre OCS y Amp
AflII (BspTI)C^TTAAG1747entre OCS y Amp
BglIIA^GATCT1757entre OCS y Amp
ApaI (PspOMI)GGGCC^C1768entre OCS y Amp
KpnI (Acc65I)GGTAC^C1774entre OCS y Amp
BsaI (Eco31I)GGTCTC(1/5)3274en Amp
SapI (BspQI, LguI)GCTCTTC(1/4)4345entre ColE1 y 35S-Pro

Corte doble: SfiI (92, 1751), PvuI (1926, 2971), PvuII (1895, 4408), XmnI (394, 2740).

Sin sitio: SphI, XhoI, NdeI, NheI, AscI, PacI, SbfI, FseI, PmeI, SwaI, AvrII, BsiWI, AgeI, HpaI, NsiI, SacII, AatII, BstEII, AarI.

Calculado a partir de la secuencia GenBank para 50 enzimas comunes; las posiciones son el corte en la hebra superior, sin metilación Dam/Dcm. Compare vectores en el buscador de sitios de restricción.

Promotor 1
35s
Gen 1
mEGFP
Características
dicotiledóneas y monocotiledóneas
Otros marcadores
Amp
Tamaño
4553 bp, circular
Fecha del registro
26-AUG-2020

Construcción

  • 35S-Pro–mEGFP · OCS · casete con inserto, 106–1737
  • MCS · 8 sitios únicos · en 527, 570
  • SfiI ×2 · flanquea el casete 35S-Pro–mEGFP · en 92, 1751

Ligation of GFP-Hind-Sal* into B629p35s-LGFP*

Extraído del archivo GenBank; compare todos los vectores en la tabla de múltiples casetes de expresión.

Elementos anotados

ElementoTipoInicioFinLongitudHebra
35S-ProPromotor misc_feature106528423+
TATASitio CDS4945007+
mEGFPSecuencia codificante CDS6271005379+
F64L/S65T - enhanced fluorescenceSitio misc_feature8168216+
ST-LS1Secuencia codificante CDS10061194189+
mEGFPSecuencia codificante CDS11951532338+
A206K - monomeric proteinSitio misc_feature143114333+
OCSTerminador misc_feature15421737196+
AmpMarcador de selección misc_feature25533413861+
ColE1Origen / backbone misc_feature34564172717+

PromotorSecuencia codificanteTerminadorMarcador de selecciónOrigen / backboneBorde del T-DNASitio

Los tipos de elemento se deducen de las anotaciones del archivo GenBank; la referencia es el propio archivo.

Cómo citar

Cite el vector así en la sección de Materiales y métodos.

p35s-LmEGFP (D360; DNA Cloning Service e.K., Hamburg, Germany; https://dna-cloning.com/vectors/puc/p35s-LmEGFP; RRID:SCR_029231)

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